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        WB条带很丑,而且还是皱眉条带?

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        dxy_r8ysszr4

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        蛋白浓度四五百,上样20μL,10%的胶,不清楚为啥条带是这样的,求大佬们指导下,谢谢

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        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        蛋白的浓度太大,而且ph也需要调节

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        蛋白浓度太高了,样品量太大,上个10ul就可以了

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        可能由以下几个方面的原因引起:

        蛋白质的完整性:如果蛋白质存在降解或者裂解的情况,可能会导致条带的不美观。可以考虑使用蛋白酶抑制剂等方法,保护蛋白质的完整性。

        蛋白质的迁移:如果蛋白质没有完全迁移到PVDF膜上,可能会导致条带的不美观。可以考虑增加迁移时间或者使用半干燥法进行膜上电泳。

        蛋白质的过量:如果样品中蛋白质含量过高,可能会导致条带过度暗淡或者皱眉条带。可以考虑适当稀释样品或者调整蛋白质负荷量。

        胶的质量:如果使用的SDS-PAGE胶质量较差,可能会影响蛋白质的迁移和分离,从而导致条带不美观。可以尝试更换不同质量的胶进行电泳试验。

        总之,需要通过综合分析以上几个方面的因素,对实验进行适当的优化和改进。

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