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        pcr扩增目的条带上有一条淡淡的条带?

        相关实验:多药抗药基因的表达实验

        user-title

        未来L04X

        我想问下常规pcr扩增,跑出来了目的条带,大小亮度都很符合预期,但是在这上面还有一条淡淡的条带是什么原因

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        5 个回答

        user-title

        Keven轩

        有帮助

        应该是由于引物特异性不足引起的错配,导致扩增出目标条带以外的条带

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        淡淡的条带主要是污染的问题,去除污染就好了

        user-title

        sswei

        有帮助

        是引物和模板的问题了.要好好看看引物特异性好不好,dimer亮不亮,(自身发夹一般不会有太大影响)模板的话,要看看GC含量高不高,模板质量好不好.引物不好只能重新设计.模板不好可以加点DMSO。

        user-title

        高山云初

        有帮助

        这是形成的引物二聚体,可以不用管。你可以把你的引物在NCBI的prime-blast上比对一下,看下引物的互补性。可能是引物浓度过高和退火温度不适引起。

        user-title

        周末也要努力呀

        有帮助

        浓度过低,时间过短都有可能,增加上样浓度试一下

        user-title

        未来L04Xuser-title

        引物浓度低吗

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