• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        常规pcr扩增跑不出来什么原因?

        相关实验:多药抗药基因的表达实验

        user-title

        未来L04X

        • 图片描述
        • 模板是动物DNA,最下面条带是引物加多了的原因,除此之外产物没有跑出来,最右边是marker,marker没问题,电泳过程没问题吧,pcr反应体系有模板,引物,dd水,mix,pcr反应程序也是一般的,实验室其他人跑出来了,就我没有,是DNA模板的问题吗?十几对引物都跑不出来,什么都没有,用的同一个DNA模板


        wx-share
        分享

        3 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        考虑是模版的问题,建议更换模版后再做

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        考虑以下几点原因及建议:

        1、酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。


        2、模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。


        3、变性温度是否准确。PCR仪指示温度与实际温度是否相符,过高酶在前几个循环就迅速失活;过低则模板变性不彻底。


        4、反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶。应在未加Taq酶以前,将反应体系95℃加热5-10分钟。


        5、引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。

        user-title

        高山云初

        有帮助

        可能是模板的问题,提取不完整,其中不含你的目的基因,或目的基因含量太低。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序