做WB的时候，有一条非特异性的条带与我的目的条带很近，怎么分开呢？
丁香园论坛
8893
最近做IkBa，用的santa cruze的抗体，过去用的抗体都特别号只有一条很特异性的条带，但是最近换了相同货号的另一个批次的抗体上面总是有一天很浓的非特异性条带，配的10%的胶，12%， 8%的，都是分的不开，也尝试过跑的时间久点，可是都分的不是很开，有时候偶尔会分的比较好，就是明显能看到时两条带，很烦人，而且还很浓。不知道该怎么办？请求高人指点指点！感激不尽！
actually you don't need to worry about the nonspecific band. don't try to photoshop away the nonspecific band, you can submit the original picture to journal and it can be published for sure.
karoleaf wrote:
actually you don't need to worry about the nonspecific band. don't try to photoshop away the nonspecific band, you can submit the original picture to journal and it can be published for sure.
谢谢你，可是非特异性条带影响我的特异性条带。。导致有时候本来有区别的变的差别不是很大了。
楼主可以尝试一下剪膜的时候把上面的一条剪掉
xlj407 wrote:
楼主可以尝试一下剪膜的时候把上面的一条剪掉
就是挨的特别近，不好搞啊，近的特影响我的特异性条带，二来，我怎么搞都很难把它两分的开点，唉。
1）换抗体
2）如为多克隆，可用相应peptide处理。
2）如为多克隆，可用相应peptide处理。
不知道有没试过牛奶封闭时间延长或者BSA封闭呢
ahuchxq wrote:
最近做IkBa，用的santa cruze的抗体，过去用的抗体都特别号只有一条很特异性的条带，但是最近换了相同货号的另一个批次的抗体上面总是有一天很浓的非特异性条带，
Santa Cruz的抗体确实不敢恭维，LZ的经历也再次说明Santa Cruz的抗体确实如有的站友说的，是外包到其它国家（如中国、印度）生产的，甚至同一种抗体都未必是一个厂家生产的，所以质量根本得不到保证。Santa Cruz的抗体看起来是价格便宜量又足，事实上，并非如此，LZ的经历和无数站友的经历已经并将继续证明这一点。
楼主已经用过我们Signalway的抗体，结果做出来很好，没有杂带
selenium wrote:
楼主已经用过我们Signalway的抗体，结果做出来很好，没有杂带
???????
http://www.bioworlde.com/I%CE%BAB-%CE%B1+%28L26%29+pAb 听说bioworld有这个IkBa的，效果不错。
chuckdouble wrote:
???????
确实试用过他们家的抗体，是没有杂带，但是信号比较弱。
本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号：shixiongcoming
