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        PCR扩增10微升可以25微升无条带是为什么?

        相关实验:多药抗药基因的表达实验

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        dxy_qyq6svdq

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        3 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        上样量太大以后,会加重pcr负荷,导致失败

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        loveliufudan

        有帮助

        出现这种情况可能是以下原因之一:

        反应条件不足:PCR反应需要特定的反应条件,如温度、时间、酶浓度和核酸模板浓度等。如果这些条件不足,PCR扩增可能无法进行,导致没有条带出现。建议检查PCR反应条件是否正确,并尝试优化反应条件。

        核酸模板浓度过低:PCR扩增需要足够的核酸模板浓度才能进行扩增,如果核酸模板浓度过低,PCR扩增可能会失败。建议检查核酸模板的浓度,并尝试增加模板的用量。

        等电点不匹配:PCR扩增需要匹配适当的引物序列,如果引物的等电点不匹配,可能会导致PCR扩增失败。建议检查引物的等电点是否匹配,并尝试使用新的引物。

        某些杂质的影响:某些杂质,如蛋白质、多聚物、盐等可能会干扰PCR反应,导致扩增失败。建议检查反应体系是否含有这些杂质,以及检查PCR反应的纯度。

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        huarenqiang5

        有帮助

        考虑以下几点原因如模板浓度,引物长度及GC含量,引物浓度,dNTPs浓度,选用的taq enzyme,缓冲液的离子含量,产物大小,变性时间,退火温度及时间,延长的时间。

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