构建载体时候，菌落PCR有目的条带，但是测序发现不是目的片段，是怎么回事？

请问最后怎么解决的呀，我也和你一样验证了前面后面和基因三种都有，但是测序就是没有结果，想问下怎么解决的，感谢🙏！

你是用的pcr插入片段的引物进行的pcr，还是用的载体上的引物进行的pcr，如果用的是插入片段的引物的话，可能就是假阳性。

可能是你的引物设计不合适，选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。也可能是你的靶序列或扩增产物的交叉污染，整个基因组或大片段的交叉污染，导致假阳性。

平板的储存条件是什么呢？可能储存条件不正确导致质粒重组了。