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    双酶切验证成功，但测序结果显示空载怎么回事？

    相关实验：质粒的制备

    user-title

    dxy_o0rwzjt4

    构建载体的时候，双酶切验证是成功的，但是几次送测序结果显示空载，这是怎么回事？

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    4 个回答

    user-title

    dxy_mqg1dtg8

    有帮助

    是不是两个酶切位点距离太近，或者是载体上其他地方还有这两个酶切位点

    user-title

    dxy_xextz7w2

    有帮助

    酶切显示成功而测序是空载说明目的基因片段并没有和载体连接成功，可能是载体出现了自连

    user-title

    土井挞克树

    有帮助

    pcr产物和质粒DNA酶切后与没有酶切的在同一块胶上电泳，如果两个酶切位点很近，几乎看不到被切下来的小片段条带（太小，早就跑出去了）就会造成空载

    user-title

    sswei

    有帮助

    可能存在不符合条带大小的情况。可以在原先的那两个酶切位点的外边再找其他两个酶切一下试试。

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