• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        Colony PCR--菌落PCR

        互联网

        3091
         

        This procedure will work for both yeast and E. coli:
        Take a small colony and suspend it in 5ul of H2O in a PCR tube. Heat for 5 min at 95¡C and then spin the condensation down in a microfuge. Set up the PCR reaction as follows:

         

        5ul H2O + cells
        5ul 5uM primer2
        5ul 10XTaq Buffer
        5ul 2mM dNTPs
        0.5ul 10 mg/ml acetylated BSA
        1ul Taq DNA polymerase
        23.5 ul H2O
        PCR Conditions: 94¡C x 4min. then 35 cycles of: (94¡C x 1 min then 55¡C x 1min then 72¡C x 3min) followed by 72¡C x 20 min and a 4¡C soak. (5ul run out on a mini gel should be sufficient to see product.)

         

        10X TAQ Buffer:
        0.2M TRIS pH8.3
        15mM MgCl2
        0.25M KCl
        0.5% TWEEN 20

        <center> <p>  </p> </center>
        上一篇:Yeast Colony PCR--酵母菌落PCR   下一篇:菌落PCR,快速鉴定重组质粒
        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序