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        同源重组构载，抗性板上长的菌很少，而且都是假阳性菌

        相关实验：质粒的制备

        user-title

        dxy_oeu11rar

        不同的载体都没有阳性菌，而且抗性板上的菌只有个位数，检查了载体没有自连，还可能是什么原因导致问题出现呢

        wx-share
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        4 个回答

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        看一下，你插入片段的引物有没有问题？感觉是没有同源重组上去。或者是看一下你酶切载体的酶有没有问题。

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        应该是连接比例，或者载体酶切不彻底，目的片段等的问题，如果担心是自连状况，建议增加一个连接体系中只加载体、不加目的片段的对照，排除自连的问题

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        有可能感受态活性或者量不够，造成克隆数少。

        user-title

        未来9

        有帮助

        可能问题在于整合率非常低，加大细胞数，比如6块6厘米盘进行转染，获得更多的克隆再从中间选真克隆。

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