PriCells:动物小血管内皮细胞的分离实验材料:1.兔、狗或大鼠等动物2.1×PBS,含青霉素100u/ml和链霉素100μg/ml,pH7.43.0.2%Ⅰ型胶原酶4.眼科剪,眼科镊5.慕丝线(7号线)、细铁丝6.离心管(15ml、50ml)实验方法:1.处死动物后,局部消毒取出主动脉,用加入抗菌素的PBS冲洗,放入盛有PBS的平皿中,摘除血管外的脂肪和结缔组织。2.用细丝 ...
动物气管和支气管假复层纤毛柱状上皮细胞的培养实验材料:1.大鼠或兔的气管和支气管2.0.1%中性蛋白酶或0.125%胰蛋白酶和0.01%EDTA混合消化液3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS(pH7.4),含青霉素100u/ml和链霉素100μg/ml,pH7.44.解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊5.一次性注射器(1ml或5ml)6.200目不锈钢网筛7.离心 ...
动物淋巴管内皮细胞的分离基本方案2:植块培养法实验材料:1.哺乳动物胸导管或肠系膜淋巴管2.1%明胶铺底,置超净台晾干3.1×PBS,含青霉素100u/ml和链霉素100μg/ml,pH7.44.眼科剪,眼科镊5.慕丝线(7号线)、细铁丝6.离心管(15ml、50ml)实验方法:1.处死动物后,打开胸腔,分离胸导管,在胸导管上端结扎,切取10-15cm的一段。将胸 ...
PriCells:动物淋巴管内皮细胞的分离基本方案1:灌注消化法实验材料:1.哺乳动物胸导管淋巴管2.1×PBS,含青霉素100u/ml和链霉素100μg/ml,pH7.43.0.2%Ⅰ型胶原酶4.眼科剪,眼科镊5.慕丝线(7号线)、细铁丝6.离心管(15ml、50ml)实验方法:1.处死动物后,打开胸腔,分离胸导管,在胸导管上端结扎,切取10-15cm的一段。将胸导管放入预冷PB ...
PriCells:人真皮复合培养法实验材料:1.早产儿或死亡胎儿的皮肤,也可用手术取下的成体皮肤2.1000000U/L中性蛋白酶,0.25%胰蛋白酶3.MEM和HBSS混合液,添加20mmol/LHEPES、200000IU/L青霉素和200mg/L链霉素和1.59g/L庆大霉素,HBSS4.手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊5.不锈钢网6.离心管(15ml、50ml)实验方 ...
PriCells:人角质形成细胞的分离培养实验材料:1.早产儿或死亡胎儿的皮肤,也可用手术取下的成体皮肤2.1000000U/L中性蛋白酶,0.25%胰蛋白酶3.MEM和HBSS混合液,添加20mmol/LHEPES、200000IU/L青霉素和200mg/L链霉素和1.5g/L庆大霉素4.手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊5.离心管(15ml、50ml)实验方法:1.取厚1 ...
PriCells:小鼠乳腺上皮细胞培养实验材料:1.10-12周龄妊娠小鼠乳腺组织2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.43.FBS、含5%牛血清白蛋白(BSA)的PBS液或DMEM4.0.05%Ⅰ型胶原酶50ml、0.05%蛋白酶50ml、0.1%DNaseⅠ型、结晶紫(0.1%)/枸橼酸(0. ...
PriCells:正常人乳腺上皮细胞培养实验材料:1.人哺乳期早期或断奶后乳汁。2.培养液:RPMI1640,15%FBS,10%人血清,50μg/ml霍乱毒素,0.5mg/ml氢化可的松,1mg/ml胰岛素。3.HuS(humanserum):血库过期的血清,澳大利亚抗原阴性。5cmNunc塑料培养皿。4.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200m ...
PriCells:正常人表皮黑色素细胞的培养实验材料:1.临床活检获取的正常人皮肤材料或新生儿阴茎包皮;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.黑素细胞培养液和培养基中各种添加剂的配制:包括以下种类:①胰岛素。贮存液为5mg/ml,即将0.5g的胰岛素溶于1ml0.01mol/L的HCl液中,双蒸水加至100ml,过滤 ...
PriCells:正常人表皮朗格汉斯细胞的培养实验材料:1.多来自外科手术的临床病人或死亡时间不超过24h尸体的胸、腹部皮肤;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.培养用液:①RPMI1640完全培养液,由RPMI1640培养基添加10%人AB血清、2mol/L谷氨酰胺、50μg/ml庆大霉素和1μg/ml消炎痛;②D ...
PriCells:动物胃黏膜上皮细胞的培养实验材料:1.动物胎体胃黏膜,胃溃疡或胃癌手术切除的正常胃黏膜组织2.1%Ⅳ胶原蛋白或1%明胶铺培养瓶,4℃冰箱内过夜,使用前在37℃培养箱内放置2h,然后用培养液浸洗1次。3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.44.250000U/LⅠ型胶原酶或125 ...
正常大兔主动脉平滑肌细胞培养实验材料:1.正常大兔主动脉2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.23.消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%胶原酶Ⅰ4.细胞培养瓶(T25)5.手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6.网筛(100目)7.离心管(15ml、50ml)实验方法:1.处死大兔,分离出主动脉 ...
PriCells:动物子宫颈部上皮细胞的培养实验材料:1.动物子宫颈部穿刺或切除所得组织2.3T3成纤维细胞3.0.25%胰蛋白酶/EDTA4.KCM:DMEM中添加10%FBS、0.5ug/ml氢化可的松和1×10-10mol/L霍乱毒素5.EGF:100ugEGF溶于1ml无菌的UPW中。按100ul分装,在-20℃条件下储存。用10ml的含有血清的培养液配制100ug/mlEGF ...
PriCells:动物肠黏膜上皮细胞的培养实验材料:1.动物胎体小肠黏膜或死亡胎儿的小肠黏膜2.1%Ⅳ胶原蛋白铺培养瓶,放超净工作台上干燥3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.44.300000U/LⅪ型胶原酶和0.1g/LⅠ型中性蛋白酶混合消化液,DMEM配置5.解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 ...
PriCells:正常大鼠巨噬细胞的培养实验材料:1.成年大鼠或小鼠,采用腹腔取材法2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.23.培养基:RPMI1640、Ham’sF12等均适于巨噬细胞的培养。大多数巨噬细胞的培养可加10%-40%的血清,小鼠巨噬细胞加10%小牛血清,用无血清培养基亦可。新生小牛血清中含有抗体,能刺激巨噬细 ...
正常动物肺肥大细胞的培养实验材料:1.正常动物的肺组织;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.TE液:Tyrode液加入2mmol/LEDTA。Tyrode液含137mmol/LNaCl、2.7mmol/LKCl、0.36mmol/LNaH2PO4、5.55mmol/L葡萄糖;4. ...
正常大鼠皮肤肥大细胞的培养实验材料:1.正常大鼠(体重150g—250g)的皮肤;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.消化液:1g/L胶原酶和1g/L透明质酸酶(1:1,v/v)混合消化液,用含10mmol/LHEPES和20%FBS的HBSS配制;4.冲洗液:改良的Tyrode液,含137mm ...
PriCells:正常小鼠原代破骨细胞培养方案实验材料:1.正常小鼠乳鼠颅盖骨组织;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.0.1%Ⅰ型胶原酶;4.培养器具:培养瓶或皿(用多聚赖氨酸包被)、200目不锈钢网筛、眼科剪、镊子等;培养方法:1.选用出生1-3天小鼠乳鼠,处死,放入75%酒精中浸泡2—3分钟,转至超净工作台 ...
正常兔原代晶状体上皮细胞培养方案实验材料:1.正常兔晶状体组织;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.注射器;4.培养器具:培养瓶或皿(用多聚赖氨酸包被)、眼科剪、镊子等;培养方法:1.空气注射处死大兔,在无菌条件下清除巩膜外肌肉及结缔组织后将眼球浸入含双抗的1×PBS(pH7.2)浸泡5min, ...
正常大兔主动脉内皮细胞的培养实验材料:1.正常大兔主动脉;2.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3.培养用液:M199培养液(含20%小牛血清);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素;4.培养器具:培养瓶或 ...