• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        动物气管和支气管假复层纤毛柱状上皮细胞的培养

        互联网

        3752

        实验材料:

        1. 大鼠或兔的气管和支气管

        2. 0.1%中性蛋白酶或0.125%胰蛋白酶和0.01%EDTA混合消化液

        3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS(pH 7.4),含青霉素100u/ml和链霉素100μg/ml,pH7.4

        4. 解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊

        5. 一次性注射器(1ml或5ml)

        6. 200目不锈钢网筛

        7. 离心管(15ml、50ml)

        实验方法:

        1. 在无菌条件下取气管或支气管,用PBS反复冲洗,以除去血液和粘液。

        2. 将气管或支气管的一端结扎,另一端插套管并固定。用注射器经套管注入1%中性蛋白酶,至气管充盈为止。将气管浸泡于PBS中,在37℃条件下消化20min。

        3. 用注射器抽取培养液,将注射器插入套管,反复冲洗,以分离气管上皮细胞。然后,将气管或支气管游离端的结扎线剪断,回收管腔内的细胞悬液。

        4. 用200目不锈钢网筛过滤,将滤液离心(1000r/min,10min)。弃上清液后,再用培养液洗涤离心1次。

        5. 用培养液悬浮沉淀细胞,调整细胞密度至5×106 个/ml,接种于培养皿或培养板,放入37℃、5% CO2 培养箱内培养。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序