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shmicy2001 请问各位战友，小弟现在想做关于某个基因缺失后引起的基因转录和表达方面改变的研究，我只知道：1.研究基因转录水平改变是检测其mRNA，最常用的是RT-PCR及荧光RT-PCR等方法,请问这方面有什么注意事项没有呢？2.检测其蛋白质:用的最多的应该是Western Blot吧...但是因为我的标本只有患者的血液，假如真的存在因为基因缺失造成的相应功能蛋白表达改变（如降低等），不知道血液中的蛋白量的检测该如 ...

fgh2005 文章修回编辑问肿瘤标本miRNA表达情况，我该怎么回答，还是补做实验。谢谢！（我只做细胞系相关实验）侠骨仁医 我觉得有两个办法：1。最好的办法当然是去找一些肿瘤组织和正常组织，检测miRNA，这样是最理想的。2。如果实在弄不到标本，你就引用别人的文献，说明此miRNA在肿瘤标本中的表达情况，并且说明你的实验主要是focus在basic research上面的，这样别人应该可以理解。霍一刀hxs fgh2005 wro ...

duanshengyu0223 请问大家一下stk15这个基因一般都是做的那些位点啊侠骨仁医 stk15应该就是Aurora Kinase，目前做的比较多的多态性是T91A F31I Phe31Ile，但是在不同肿瘤和STK15多态性的关联是不一样的，关键看你的研究目的。建议楼主自己好好复习文献，应该可以得到不少启发，附上两篇相关我文献。duanshengyu0223 嗯，谢谢了啊，因为最近在做这个基因关于结直肠癌方面的论文，所以 ...

wowis 研究生复试结束老板给个任务叫找些研究signal pathway的大牛的文章先读读可是我不知道如何获取这些大牛们文章请知道的前辈告诉几个这方面的大牛或者告诉一下如何自己去找到先谢谢了！haonan_1985 可以先用信号通路signal pathway为关键字在google学术或pubmed等数据库中搜索找到影响因子在15分以上的文章，里面的作者基本上可以称为信号通路牛人了ylhuang0502 其实这个老 ...

xyqtf 如题！那么NF-κB属于哪一类？谢谢！xyqtf 啊，这个研究信号转到的版块，还没有兄弟分清这个概念吗，还是太简单不消一顾。谢谢能帮助我一下。doctormy xyqtf wrote:如题！那么NF-κB属于哪一类？谢谢！NF-κB是核转录因子，不属于炎症介质or炎症因子。查阅了最新版的八年制病理教科书，只找到炎症介质的定义，未找到炎症因子的定义或提法。zfyyzz00 doctormy wrote:NF-κB是核转录因子，不属于 ...

ydh790214 请问有小鼠的组织特异性表达查询工具吗？多谢！freecell http://www.informatics.jax.org/expression.shtmlhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2438328/ydh790214 freecell wrote:http://www.informatics.jax.org/expression.shtmlhttp://www.nc ...

zenth197 请问有做early polyadenylation的前辈或者熟悉这方面工作的前辈吗？可以否介绍下相关的研究方法？我现在对于设计特异的扩增目的基因early polyadenylation产物的引物感到很困惑，希望能得到大家的帮助。感激不尽！freecell http://scholar.google.com/scholar?as_q=%22early+polyadenylation%22&num=100&btnG= ...

ssair 各位，请问质粒pFLAG-CMV2中的pFLAG是什么意思？hyjtb 如果没有估计错的话，应该是从一种有鞭毛的菌中提取出来的治理改造过的载体，如果有谁知道得更确切，指点一下大家。。赫赫。。zhujoker 只是载体上的一个标签，可以用于构建融合蛋白，以便于检测抗体不好的蛋白。yabxxh 严重同意版主的签名本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信 ...

biophysics 网上有无数多的转录因子结合位点预测工具，我想问的是这些预测的位点全部是基于染色体的正链吗？因为数据库是以正链为序列的。那如果一个基因转录的模板链如果是负链的话，那转录因子结合位点的预测不是错了？freecell 一般是根据mRNA序列来预测的。biophysics 谢谢，文献报道的全基因组转录因子位点预测如何做的呢？是要从细胞中提总mRNA，反转录测序再预测还是怎么做？全基因组的mRNA序列好象不 ...

wangbing2053688 哪位大侠有CHO细胞偏爱密码子，请不吝赐教，谢谢！freecell http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17086290http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9358069wangbing2053688 非常感谢！wangbing2053688 不知哪位大侠能不能将表格发给我啊？文章下不下来啊！wangbing2053688 没有人理我啊？有没 ...

lizzi 基因组dna文库和cdna文库在构建原理和用途上的主要区别是什么zhujoker cDNA文库以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在不同环境条件、不同分化时 ...

cdongni 我测蛋白质用的是Bradford法，实验室的酶标仪只有570nm 没有595，请问大家，用570测稳定吗？准确吗？我现在的R2只能到96！zhujoker 这个问题你只能问公司了？最好还是找一个595nm测吸光度的。但是做流失时像这种差距还是能做的，但是不知道是不是也适合测蛋白？dlzhangyu 可以的。以下是来自碧云天的说明书：使用说明：1. 完全溶解蛋白标准品，取10μl稀释至100μl，使终浓度为0.5mg/m ...

liuying6477 想做mirna的抑制和过表达，请问1.过表达是否直接转ssc-let-7c MI0002445 stem-loopUGUGUGCAUCCGGGUUGAGGUAGUAGGUUGUAUGGUUUAGAGUUACACCGUGGGAGUUAACUGUACAACCUUCUAGCUUUCCUUGGAGCACACU2.抑制表达是否是上个stem-loop序列的反义还是ssc-let-7c MIMAT000215 ...

galaxyzj 我有一个真核表达载体，包含一个Iba1启动子，来源于巨噬细胞的特异性基因Iba1，因此是个组织特异性的启动子，用来控制GFP的表达。启动子的结构见图1，其中加框部分是外显子序列。载体的结构见图2。载体的构建人说，这个载体的开放阅读框起始是Iba1基因自身的ATG，也就是图1里面Exon1内部加了下划红线ATG，GFP的起始密码ATG也是在一个读码框内。因此，这个载体最后表达GFP蛋白，并且N端融合 ...

redsky 我在mirbase查到hsa-mir-34a的序列如下：hsa-mir-34a MI0000268GGCCAGCUGUGAGUGUUUCUUUGGCAGUGUCUUAGCUGGUUGUUGUGAGCAAUAGUAAGGAAGCAAUCAGCAAGUAUACUGCCCUAGAAGUGCUGCACGUUGUGGGGCCC我在ensemble查hsa-mir-34a序列及其上游(5'端）10bp序列变成如下 ...

shuaibo2008 新手请教各位高手，我准备做AngII的相关实验，不知道如何分装保存，是买来的全都-20°C分装保存，还是先称取一部分分装，如果是称取部分的话，能用0.22um的滤器滤过吗？说明书很不详细啊。期待帮助哦，太感谢了zhujoker 你一部分分装也是分，还不如全分装。只要分装无菌完全可以不过滤的。侠骨仁医 如果不是在短期内使用的话，我建议你分装粉末，而不要溶解，因为溶解稀释后，浓度相对较低比较容易降解；如果万一 ...

lsdcfhyj 组成型的stat3的磷酸化是指先由基因先表达出stat3蛋白，再由细胞内的磷酸激酶使stat3磷酸化，还是细胞本身就能直接表达出磷酸化的stat3？谢谢bigbang_0_0 是前者，是条件非依赖的，一表达，就被磷酸化。是不受诱导的磷酸化。且不被去磷酸化。lsdcfhyj 谢谢你的回答，你的意思是细胞中的磷酸酶也不能使其去磷酸化吗？bigbang_0_0 lsdcfhyj wrote:谢谢你的回答，你的意思是细胞中 ...

ybcz1974 本人刚刚涉及分子生物学领域，可能说得很不转业，请勿见笑！最近想做一种非整数倍染色体病的研究，有几个问题想请教大家：1、如果这种疾病是由于某一条染色体多一条引起，除了基因（DNA）数量上的改变，会不会出现基因组的差异，例如出现新的基因？或者基因突变？2、通过患者与对照血清基因筛选是否有意义？有没有可能发现基因表达差异？如何进行基因筛选？3、每条染色体都表达数百种基因，通过何种方法可以找到某条染色体特异性 ...

JaneyJuan 请教各位大侠：我现在手上有一个真菌的ITS序列，请问怎样标示其中的ITS1、5.8S rDNA、ITS2和18S rDNA区域？急~~~请高手帮忙！非常感谢~~freecell 你是不知道用什么软件在已知的ITS上去标示这些区域，还是不知道“ITS1、5.8S rDNA、ITS2和18S rDNA区域”在你手头ITS上的具体位置，想知道怎么样找到这些区域在ITS上的位置？JaneyJuan freecell wrote:你是不知 ...

霍一刀hxs 各位高手，有没有专业的网站，可以根据一段cDNA序列，预测一下它的UTR区的序列？多谢。freecell http://171.66.122.45/content/15/5/742.fullor tryhttp://www.google.com/#hl=en&source=hp&q=+utr+prediction&aq=f&aqi=g-m1&aql=&oq=&gs_rfai=&fp=bcdf8cbbf06dc4f霍一刀hxs 谢谢freece ...