【求助】甲基化敏感的限制性指纹技术(MRSF)

甲基化敏感的限制性指纹技术(MRSF)是什么？应该怎么做？谢谢！

应该是一种表观遗传学的技术。R.Sadri et al. Rapid analysis of DNA methylation using new restriction enzyme sites created by bisulfite modification. Nucleic Acids Res. (1996) 24: 4987-4989仅供参考。

能不能介绍的详细一些？或是提供实验的操作步骤？谢谢

该法结合限制性酶切和PCR技术，从基因组水平筛选差异的甲基化片段。步骤：将基因组DNA分别进行单酶切（甲基化非敏感性酶，识别切割TTAA序列但保持CGCG序列的完整）和双酶切（甲基化非敏感性酶和甲基化敏感性酶，后者识别并切割非甲基化的CGCG序列），将两组酶切产物以随机引物进行PCR扩增，结果是：甲基化的CpG岛可扩增出产物，非甲基化的CpG岛因被甲基化敏感性酶切割而无法得到PCR产物，由此可显示相映样本中的差异甲基化片段。该法可以检测全基因组几乎所有CpG岛，但需大量PCR扩增，较为繁琐，可用于筛选新的差异甲基化片段。有篇中文综述，可以先参考一下：表观基因组学研究方法进展与评价 ，2009 作者 谭建新, 孙玉洁 。

学习中，谢谢！