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cindy10moon 写综述，看到一篇文献提到Cysteine string protein (CSPa)，说是HSP40家族中的一员，哪位高人知道怎么翻译？说和神经再生和突触传导相关，小妹**！zhujoker 半胱氨酸串联蛋白质好像比较合适了，自己再找找吧cindy10moon zhujoker wrote:半胱氨酸串联蛋白质好像比较合适了，自己再找找吧谢谢，直译是这个了，不过网上搜不到这个中文名称，所以不太敢用本文由丁香园论坛提供 ...

zhangqiang6612 最近做wb时，转膜后mark很淡，几乎没有转膜条件：300mA，恒流 45min，分子量大小40kd丽春红染膜后，条带很淡转膜液配方：Tris 5.8g，甘氨酸2.9g,甲醇200ml/L,补足液体(去离子水)至1000ml请高位高手指点蓝天飞龙 有图吗？zhanghai123 没有SDS?zhanghai123 还有1g SDSaileen83 我做western的转膜缓冲液：Tris:3g, Glycine:14.4g, ...

shenghaoisbest 文献中有的说N1-ICD是110KD，有的说是63KD。全长Notch受体被酶切后有几种形式？各自的分子量为多少？很是苦恼，盼高人指点。jessica127127 应为110 KD企鹅mpp 请问，NICD分子量到底是多少，为什么每个说的都不一样呢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

liufengxi HIV-1 Tat (47-57) N-term Cys 序列 H-CYGRKKRRQRRR-NH2 ；原始HIV-1 Tat (47-57)序列为YGRKKRRQRRR 。N端的半胱氨酸修饰是为了利用其含有的巯基和其他分子反应，但是C端得-NH2的修饰是什么目的呢？有这个修饰的必要吗？是为了增强多肽的活性，还是发挥一个阻断活性COOH的作用？ 附件是关于HIV-1 Tat (47-57) N-term Cys的产品介绍。请高手指导.dnazyme 个人愚见：C端得 ...

杨蕾医生 PBS是为了洗掉培养基 以便胰酶的消化 可是 能否用双蒸水呢lmnsmu 不可以用ddH2O，它里面没有离子，渗透压与细胞内液不同，会导致细胞水肿。不过偶尔用一次，时间短也不会有太大的影响。杨蕾医生 lmnsmu wrote:不可以用ddH2O，它里面没有离子，渗透压与细胞内液不同，会导致细胞水肿。不过偶尔用一次，时间短也不会有太大的影响。嗯 有道理 谢谢指点啦knightkidd 考虑渗透压！不然全爆了~本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用 ...

妍会 最近在养HCT116细胞，DMEM+10%胎牛血清，感觉细胞生长状态不好，虽然2天换液，但是培养基里悬浮有很多死细胞，细胞生长缓慢。最主要的，贴壁的细胞中有很大团的东西，又不像是细胞，消化之后，那些大团的东西就成了大泡，比正常细胞大数倍。养了大约2周后发现正常细胞变少了，大泡反而增多了，好像细胞被吃掉了一样。非常想知道是什么原因，不知道这种细胞状态做了转染之后会是怎么样的？急求高手指教！先谢了！zhangshuxi ...

push 1、如何从组织/细胞中提取线粒体总RNA？请各位大牛指点，谢谢。2.目的基因编码的蛋白质A在线粒体中有表达，此蛋白质A是一种核编码的蛋白质；请问能否从线粒体中提取到A蛋白的mRNA?如何提取？谢谢各位指点。knightkidd 应该只能梯度离心分离细胞器然后分离MRNA了吧，如果蛋白是表达在线粒体里应该能在线粒体中提取到其MRNA毕竟要运送到核糖体进行翻译的，不过量就难以判断了，可以试试！woxingwosu 仅 ...

xxzjcg 求助人的twist基因的全序列，谢谢slytjiaofei 按你的实际需要选择相应选项，结果见下面的链接！！！http://genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgNear?hgsid=191200469&org=Human&db=hg19&near_search=uc003sum.2&near_order=expGnfAtlas2&near_count=50&near.do.getSeqPage=sequen ...

naj2007 请教一下各位老师，在构建过表达载体的时候，VEGF和GFP是不是不可以做成融合蛋白，但是如果用不同的启动子的话，很容易丢失荧光，有没有什么解决方法。zhujoker 可以做成融合蛋白的，即使是使用不同的启动子的话荧光也不那么容易丢失的，大不了你将荧光的启动子换成强的如CMV，EF1a之类。kinguangjun 或者你可以用CMV-VEGF-IRES-GFP来做也可以，这样用一个启动子CMV同时表达两个蛋白 ...

nihaifeng 有做寻做notch信号通路的同道吗？我计划在肾脏方面，做notch信号通路。和大家一起讨论，可行性。wanahn8368 我是做肝癌的，也在关注Notchlaochu2000 我也准备做。交流交流.ss1002 我也准备做，多交流。QQ：583316182nihaifeng 楼上的另外二位，留QQ，我们一起聊聊。wanahn8368 30156678巧克力0925 我在做关于肿瘤方面的。384049290 我也是做肿瘤方面 ...

mckf111 现在用pEGFP-IRES2载体转染黑素瘤B16F10细胞 筛选前转染效率有20% 先1：10传代 再用700-1100mg/L G418分组筛选 基本3天后就没什么绿的了 我晕 两个月啦 就这么耗时间 后面实验。。。大家有什么建议啊bioenw 你可以考虑换个高转染效率的方法，比如用病毒构建稳定细胞mhz9988 G418浓度太高了，一般筛选浓度为400ug/mlzwh2004 在做稳定细胞株之前首先要摸清楚G418的使用浓度，不同细胞对G4 ...

feishi68 血清mirna抽血后怎么保存？运输？zhujoker 放在干冰里面就可以了。yanglong 最好是直接就做反转录，实在是没有条件反转就-80或者液氮等保存了。赵东生 请教一下，可以不提取RNA,直接拿血清作为模板做RT吗？pandace 好像那样直接用血清反转录做miR效果不好。。我之前从血清中提取过miR，量不是很多。需要用ABI那个与扩增盒子好像才有比较好的结果。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思 ...

panxiaoyun1115 各位大侠，请问MMP13可以做明胶酶谱法，用来区分MMP13的前体酶原和活化的MMP13吗？非常感谢！急盼！zhujoker 明胶酶谱法主要是用来检测有活性的MMPs，所以理论上应该可以区分开的panxiaoyun1115 版主，有活性的MMPS就是指活化的MMPS吗？或者是指：pro-mmps和活化的mmps，只要没有被特异性抑制物（TIMP）结合，都称为有活性的MMPS？谢谢！峰朗月白 回复楼上 ...

guotao123 在转基因生物中，是不是只要在启动子区检测到发生了甲基化，就可以导致表达沉默吗？还是得甲基化到一定的程度才导致表达沉默？slytjiaofei 这个不太好说，我想应该从以下两个方面考虑。第一，先看一下甲基化的程度怎样，网上有很多转录因子结合位点的预测软件，可以看看发生甲基化的部位是否在这些位点上或附近；第二，进行体外验证，可以利用甲基转移酶阴性的菌种构建含特定启动子序列的质粒载体，比较甲基化载体与非 ...

thx221 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的？？？帮忙给提供几个通路做参考！或者给我点相关的最新研究文献！我实在是找不到这方面的最新研究进展，大家帮个忙吧！先谢谢了！！！编年张 加此QQ492207858chuckdouble thx221 wrote:有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的？？？帮忙给提供几个通路做参考！或者给我点相关的最新研究文献！我实在是找不到这方面的最新研究进展，大家帮个忙吧！先谢谢了！！！你要问啥？ ...

zhaozhuozhao 各位大侠，我想请教一下：我的药物可引起细胞内活性氧的升高，NAC+药物组细胞内的活性氧检测与给药组几乎无差别，为什么呢？NAC不是或熊样的抑制剂吗？帮帮忙吧zhaozhuozhao 各位老师帮帮忙啊fanjingol 你是怎么给药的？具体的模型你说一下，又是怎么测的ROS？你要说清楚啊！zhaozhuozhao NAC我是买的碧云天的粉末，我用超纯水溶解配成10mmol/L的浓度，氢氧化钠粉末调pH值 ...

wzdalxl1314 请教 瞬时转染miRNA的寡聚核苷酸到血管平滑肌细胞中用什么转染试剂好？请大家帮帮忙，谢谢。wzdalxl1314 大家的miRNA序列都是哪里设计的 ？是上海吉玛公司的吗？ameng2011 我们实验室做脐动脉的平滑肌是用lipo2000 英骏公司的本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

kw412573902 大家好，有个十万火急的问题想得到大家的帮助：我们经过深度测序找到了一批rna，由于得到的序列结果是测序时的RNA经过公司逆转录并扩增成为PCR产物的序列，所以现在需要设计两个不同方向的逆转录引物，进行RT-PCR，确定RNA到底是正义链上的还是反义链上的序列，之前做的都挺好的，但是后来发现所有的序列都是两个方向都有的。。。而且之前的实验结果也重复不出来了。。。。我已经把所有RT-PCR过程中用 ...

fzf19871015 小弟刚接手这个实验，对信号转导实验一窍不通，老板让我查试剂盒，特请高人指点一二，是不是有专门做信号转导实验的试剂盒？（厂家，型号，价格），信号转导实验怎么设计实验方案啊？gutao 细胞信号传导通路多了，你想做那个信号啊credo 多向周围认识的同学请教，特别是做过信号转导的，再就是多找资料多看文献。我也要做这方面的实验了，也是十窍通了九窍啊，在园子里逛着找资料呢，呵呵。weicon 不好意思，我也有同样的疑 ...

yuanliang0828 请问real time PCR与RT PCR有什么区别？我想在不同时间点验证某种蛋白表达增多，可以用RT PCR吗？baby_susan RT PCR 从名称上讲 可以是real time PCR的缩写，也可以试是反转录PCR 的简写另外real time PCR和反转录PCR区别主要区别是，前者可以定量，后者只能定性看看你某种蛋白的表达增多还是减少，存在不存在，不能看出增多或较少多少melody405 real time PCR又叫Q-PCR， ...