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        【求助】sigma non-target shRNA对细胞影响

        丁香园论坛

        1650
        使用了sigma的mission系列的慢病毒做干扰,用non-target作为对照,但是发现除了目的基因,对照与空白细胞变化不大以外,其他检测的几个基因对照和空白相比,变化都很大,这是为什么呢?除了off target效应以外,还有什么可能性?那我处理数据的时候,实验组到底是以空白作为对照好呢,还是以non-target作为对照好呢?
        以non-target作为对照好

        因为target及non-target都是往细胞转了外源物质,引起细胞生理/病理,或多或少的影响,只不过target设计上作用于你的目的基因,non-target不针对你的目的基因或其他基因(广义上),但都外源核酸,

        而且还有转染时候用的转染试剂及无血清的影响

        而空白细胞则没有任何外源的影响,
        吴佰霖 wrote:
        以non-target作为对照好

        因为target及non-target都是往细胞转了外源物质,引起细胞生理/病理,或多或少的影响,只不过target设计上作用于你的目的基因,non-target不针对你的目的基因或其他基因(广义上),但都外源核酸,

        而且还有转染时候用的转染试剂及无血清的影响

        而空白细胞则没有任何外源的影响,

        关键是non-target对细胞的影响太大了,比如MMP3的表达都上升了好几倍了。

        再者,我的是筛选出来的稳定表达的克隆株。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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