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        【求助】如何沉默目标基因

        丁香园论坛

        3441
        大家好!初次过来请多指教!现在准备做RNA干扰(应该也可以叫miRNA技术吧?),我有些许问题还不明白?1 想把实验中的目标基因沉默,可以先通过软件设计序列,会有好几个备选序列,那么如何选择?请推荐好用的设计软件!!!2 如果序列选择好了,现在要转入细胞内来沉默目标基因,如何转入?我看了一些文献,几乎都用的是Lipfectamine2000,但最后沉默的时间不会太长,大概3-4天后目标基因的表达又会恢复,感觉这种方法沉默目标基因的时间是有限的;还有没其他方法能够使沉默时间持续更长;还是这种RNA干扰就是这样的结果,是一种瞬时的。对于我的目标基因来说,要看在什么时候有最好的沉默效果是不是也得设计好几个时间点(通过RT-PCR结果来看),在哪个点上的效果最好?多谢了!太久没有再接触过试验了,如果有说的不对的地方请指教!
        使用病毒做稳转细胞株,这样你怎么做都可以
        多谢zhuyoker

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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