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        小师妹请教各位高手一下引物设计

        丁香园论坛

        751
        各位尊敬的大师兄:
        以下序列是人类某整段基因组DNA转录起始点上游2826BP长度片段,老板要我PCR出转录起始点上游1500BP片段,需要设计引物,我才开始做,希望各位高手赐教.小师妹不慎感激!!!

        1 tgacagaagg agaccctgtc tcaaaaataa taagaataat aattaataat aataggccaa
        61 accaaatacc catcaccttc tgctgtgcct cccctttccc caataaatcc agtgtcttgc
        121 tttcaaattt tgtggttaaa aaagatgatg agtttctaag acgtgggggc taaagcttgt
        181 ttggccgttt tagggtttgt tggaattttt ttttcgtcta tgtacttgtg aattatttca
        241 cgtttgccat taccggttct ccatagggtg atgttcatta gcagtggtga taggttaatt
        301 ttcaccatct cttatgcggt tgaatagtca cctctgaacc actttttcct ccagtaactc
        361 ctctttcttc ggaccttctg cagccaacct gaaagaataa caaggaggtg gctggaaact
        421 tgttttaagg aaccgcctgt ccttcccccg ctggaaacct tgcacctcgg acgctcctgc
        481 tcctgccccc acctgacccc cgccctcgtt gacatccagg cgcgatgatc tctgctgcca
        541 gtagagggca cacttacttt actttcgcaa acctgaacgc gggtgctgcc cagagagggg
        601 gcggagggaa agacgctttg cagcaaaatc cagcatagcg attggttgct ccccgcgttt
        661 gcggcaaagg cctggaggca ggagtaattt gcaatcctta aagctgaatt gtgcagtgca
        721 tcggatttgg aagctactat attcacttaa cacttgaacg ctgagctgca aactcaacgg
        781 gtaataaccc atcttgaaca gcgtacatgc tatacacgca cccctttccc ccgaattgtt
        841 ttctcttttg gaggtggtgg agggagagaa aagtttactt aaaatgcctt tgggtgaggg
        901 accaaggatg agaagaatgt tttttgtttt tcatgccgtg gaataacaca aaataaaaaa
        961 tcccgaggga atatacatta tatattaaat atagatcatt tcagggagca aacaaatcat
        1021 gtgtggggct gggcaactag ctaagtcgaa gcgtaaataa aatgtgaata cacgtttgcg
        1081 ggttacatac agtgcacttt cactagtatt cagaaaaaat tgtgagtcag tgaactagga
        1141 aattaatgcc tggaaggcag ccaaatttta attagctcaa gactcccccc cccccaaaaa
        1201 aaggcacgga agtaatactc ctctcctctt ctttgatcag aatcgatgca ttttttgtgc
        1261 atgaccgcat ttccaataat aaaaggggaa agaggacctg gaaaggaatt aaacgtccgg
        1321 tttgtccggg gaggaaagag ttaacggttt ttttcacaag ggtctctgct gactcccccg
        1381 gctcggtcca caagctctcc acttgcccct tttaggaagt ccggtcccgc ggttcgggta
        1441 ccccctgccc ctcccatatt ctcccgtcta gcacctttga tttctcccaa acccggcagc
        1501 ccgagactgt tgcaaaccgg cgccacaggg cgcaaagggg atttgtctct tctgaaacct
        1561 ggctgagaaa ttgggaactc cgtgtgggag gcgtgggggt gggacggtgg ggtacagact
        1621 ggcagagagc aggcaacctc cctctcgccc tagcccagct ctggaacagg cagacacatc
        1681 tcagggctaa acagacgcct cccgcacggg gccccacgga agcctgagca ggcggggcag
        1741 gaggggcggt atctgctgct ttggcagcaa attgggggac tcagtctggg tggaaggtat
        1801 ccaatccaga tagctgtgca tacataatgc ataatacatg actcccccca acaaatgcaa
        1861 tgggagttta ttcataacgc gctctccaag tatacgtggc aatgcgttgc tgggttattt
        1921 taatcattct aggcatcgtt ttcctcctta tgcctctatc attcctccct atctacacta
        1981 acatcccacg ctctgaacgc gcgcccatta atacccttct ttcctccact ctccctggga
        2041 ctcttgatca aagcgcggcc ctttccccag ccttagcgag gcgccctgca gcctggtacg
        2101 cgcgtggcgt ggcggtgggc gcgcagtgcg ttctcggtgt ggagggcagc tgttccgcct
        2161 gcgatgattt atactcacag gacaaggatg cggtttgtca aacagtactg ctacggagga
        2221 gcagcagaga aagggagagg gtttgagagg gagcaaaaga aaatggtagg cgcgcgtagt
        2281 taattcatgc ggctctctta ctctgtttac atcctagagc tagagtgctc ggctgcccgg
        2341 ctgagtctcc tccccacctt ccccaccctc cccaccctcc ccataagcgc ccctcccggg
        2401 ttcccaaagc agagggcgtg ggggaaaaga aaaaagatcc tctctcgcta atctccgccc
        2461 accggccctt tataatgcga gggtctggac ggctgaggac ccccgagctg tgctgctcgc
        2521 ggccgccacc gccgggcccc ggccgtccct ggctcccctc ctgcctcgag aagggcaggg
        2581 cttctcagag gcttggcggg aaaaagaacg gagggaggga tcgcgctgag tataaaagcc
        2641 ggttttcggg gctttatcta actcgctgta gtaattccag cgagag
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