台盼蓝染色法
互联网
48989
材料：
1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管；
2. 试剂：0.4%台盼蓝染液；
3. 台盼蓝（Trypan blue）：0.4g；
4. 生理盐水：100ml；
操作步骤：
1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3. 再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4. 将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5. 每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6. 染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9. 统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率。
细胞活率（%）=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100。
注意事项：
1. 染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色，使监测结果偏低；
2. 另可结合细胞计数方法，同时进行细胞计数和活力检测。
