相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
29
- 英文名:
Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100T
1.台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒价格英文名称:Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
产品规格:100T
发货周期:1~3天
本试剂盒各组分均以无菌形式提供,可直接用于细胞实验。台盼蓝(TrypanBlue),一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排斥在外,因此,通过颜色的变化即可将活细胞(活细胞呈透明无色)和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝(合适浓度)还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。
使用方法
1)对于悬浮细胞,离心收集细胞,对其充分清洗后,加入适量细胞重悬液重悬细胞制成单细胞悬液;对于贴壁细胞,先用胰酶消化细胞,再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。
2)取0.1ml单细胞悬液,按照11比例与0.1ml0.4%台盼蓝染色液充分混匀,室温染色3~10min。
【注】因台盼蓝具有细胞毒性,染色时间过久会导致部分死细胞染色,干扰计数。通常染色3min即可。
3)取少量上述染色细胞加入血细胞计数板,于显微镜低倍镜下计数,分别计算着色细胞(即损伤细胞和死细胞)和总细胞。
【注1】用移液枪加染色细胞时,沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。
【注2】1mm2方格内细胞数通常控制在20-50cells,当细胞数超过200个,需重新调整稀释倍数。
4)按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比,
a,计算每ml细胞数目Cells/ml=1mm2大方格内的平均细胞数×稀释倍数×104;【注】此时的稀释倍数为步骤2所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数
b,总细胞数目Totalcells=(Cells/ml)×最初制备单细胞悬液的总体积
c,细胞活力值Viability(%)=(总细胞数-总着色细胞数)/总细胞数×100
【注】通常情况,健康的对数期培养细胞,活细胞至少占到95%。
储存条件室温,有效期2年
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品:
甘正酯.盐盐无水葡萄糖/D-葡萄糖无水物/无水α-D-葡萄糖/无水右旋糖/D-无水葡萄糖/血糖/β-D-无水葡萄糖/D-Glucose anhydrous
3-酰肼D-葡萄糖一水物/一水葡萄糖/D-喃葡糖一水合物/葡萄糖/D(+)-葡萄糖一水/α-D-葡萄糖/右旋糖/D-Glucose monohydrate
3-氧-5-溴啶D-半乳糖/右旋水解乳糖/D-(+)-Galacturonic acid
2-溴-3-酯D-半乳糖盐盐/D-半乳糖盐盐/2--2-脱氧-D-半乳糖盐盐/D-软骨糖盐盐/D-Galactosamine HC1
N-苄氧羰-去托品D-果糖-1,6-二三/1,6-二果糖三盐/FDP
5--1H-并[3,2-C]啶D-果糖-6-二/6-果糖二/F6P
N-叔氧羰-N'-芴氧羰-D-2,3-二D-果糖/D-左旋糖/果糖/ D-(-)-果糖/D-阿拉伯型已糖/水果糖/D-Fructose
1-溴-3--5-羟-β-环糊精/(2-Hydroxyethyl)-β-Cyclodextrin
N,N-二异三盐羟-β-环糊精/羟倍他环糊精/2-羟-β-环糊精/HPBCD/HPCD
4-(2,3-Dimethyl-5-sulfo-3H-indol-3-yl)benzoic acidβ-环糊精/β-Cyclodextrin
台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒价格普伐他汀标准品 Pravastatin Sodium CAS81131706
盐普莫卡标准品 Pramoxine Hydrochloride CAS637581
定标准品 Pralidoxime Chloride CAS51150
红车轴提取物标准品 Powdered Red Clover Extract CAS
水飞蓟提取物标准品 Powdered Milk Thistle Extract CAS84604206
卡瓦提取物标准品 Powdered Kava Extract CAS
生姜标准品 Powdered Ginger CAS
弗司可林末提取物标准品 Powdered Forskohlii Extract CAS
刺五加末提取物标准品 Powdered Eleuthero Extract CAS84696125
牡荆树提取物标准品 Powdered Chaste Tree Extract CAS91722473
纤维素标准品 Powdered Cellulose (AS) CAS9004346
猫爪草提取物标准品 Powdered Cat’s Claw Extract CAS289626411
升麻提取物标准品 Powdered Black Cohosh Extract CAS84776261
越橘提取物标准品 Powdered Bilberry Extract CAS
亚洲参提取物标准品 Powdered Asian Ginseng Extract CAS50647080
红 进口、国产 BCP,Na 含量超,99%
蓝 进口、国产 Bromocresolgreen 含量BR,95%
蓝 进口、国产 Bromocresolgreensodiumsalt 含量BR,90%
绿红指示剂枕 进口、国产 MethylRedmixedindicatorpowder 含量BR,95%
绿红指示剂溶 进口、国产 MethylRedmixedindicatorsolution 含量BR,98
脲苷 进口、国产 BDU 含量BR,98%
麝香草蓝 进口、国产 BTB 含量BR,98%
进口、国产 Potassiumbromate 含量70%
进口、国产 Bronorol 含量99%
雪腐镰刀 进口、国产 NIV 含量BR,96%
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验材料: 1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管; 2. 试剂:0.4%台盼蓝染液; 3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g; 4. 生理盐水:100ml; 操作步骤: 1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁
将细胞悬液与DNA结合的荧光染料混合,应用荧光显微镜观察以显示和计数伴有异常染色质的组织细胞。常用染料为丫啶橙,染色后可以检测整个细胞群中有多少细胞发生了凋亡,但不能区别活细胞和死细胞。因此将丫啶橙和溴化乙啶混合使用,根据两种染料的吸收情况可鉴定死、活细胞。 一、材料与试剂 100μg/ml丫啶橙或100μg/ml丫啶橙与100μg/ml溴化乙啶的混合物:分别用PBS配制(两种染色剂均系诱变物,操作时应十分小心)。 用完全RPMI-1640培养液配制的细胞悬液,浓度为5×
Hoechst 33258 Assay Kitfor Mycoplasma DNA 使用说明书 一、原理: 利用荧光染料(bisbenzimide,Hoechst33258)检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧
技术资料暂无技术资料 索取技术资料








