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        钌红染色法

        相关实验:细胞膜糖类电镜显示实验

        最新修订时间:

        原理

        钌红染色法的原理是钌红可以与羧基(酸性基)通过静电结合,电镜下呈电子密度高染色。

        材料与仪器

        步骤

        1. 钌红原液配制


        钌红溶于双蒸水,浓度为 10 mg/ml,60℃,振荡 10 min,3000 r/min 离心约 15 min,取上清冷藏保存。


        2. 前固定液 3% 戊二醛 2.5 ml,0.2 mol/L 二甲胂酸钠缓冲液(pH 7.3)2.5 ml,钌红原液 2.5 ml 顺序混合。


        3. 后固定液 2% 锇酸 2.5 ml,0.2 mol/L 二甲胂酸钠缓冲液(pH 7.3)2.5 ml,钌红原液 2.5 ml 顺序混合。


        4. 标本切小(1 mm3),置于前固定液中室温 1 h。


        5. 0.1 mol/L二甲胂酸钠缓冲液漂洗3次,每次 3 min。


        6. 1% 锇酸后固定液中室温固定 2 h。


        7. 漂洗、脱水、包埋同常规。

        注意事项

        细胞质膜用重金属染料如:钌红染色后,在电镜下可显示厚约10~20nm的结构,边界不甚明确.

        常见问题

        在植物病虫害组织切品染色中,可将宿主植物组织中菌丝体和孢子染成红色。

        来源于《免疫组织化学实验技术及应用》

        来源:丁香实验

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