• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        台盼蓝使用最佳浓度及时间是多少

        互联网

        29845
        问: 现在刚刚开始做干细胞,想自己计数白细胞,用的是Sigma的0.4%台盼蓝,1:1混合,从2分钟开始细胞死亡越来越多,例如2分时有10%死亡,到5分钟就死一半了,到底是几分钟计数最准确呢?& 还有一个问题,看到有1:1使用,也有1:9的,用哪种浓度最好呢?

        答1 :0.4%应该是1:1混合的,1:9的是4%浓度的,这个染色的时间不应该太长的,因为对于胎盘蓝这种大分子,不能渗透就如细胞膜,但是如果染色时间过长,会因为胞吞作用进入细胞里,所以时间长了之后看到很多细胞都是蓝色,不一定是细胞死了,可能是台盼蓝进去了,我们一般混合一下就在显微镜下看了,要是死细胞,细胞膜有破裂,细胞很快就蓝了。

        答2: 最好采用细胞计数仪计数,这样可以快速有效的将单位体积的总细胞数、活细胞数、死细胞数及细胞活性直接读出,如果用目测法只能将细胞总数大致估计出。

        答3 3分钟内观察,最好是和细胞混一下就滴出来观察,大于3分钟活细胞也会被染上不准的

        答4 台盼蓝母液是0.4%, 用的时候1:10稀释使用(1:1使用的话细胞受不了的),5分钟之内数完。
        5 P4 h; M Q, 还有就是评判细胞的死活时,染成蓝色或者镜下不透亮的细胞都是死细胞!$

        答5: 混合后要在3分钟内计数完毕,要不然细胞死的越来越多,结果不准。如果时间上来不及的话,可以先在显微镜下拍照再计数。
        (责任编辑:大汉昆仑王)

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序