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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
100T
英文名称:Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
产品规格:100T
发货周期:1~3天
本试剂盒各组分均以无菌形式提供,可直接用于细胞实验。台盼蓝(Trypan Blue),一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排斥在外,因此,通过颜色的变化即可将活细胞(活细胞呈透明无色)和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝(合适浓度)还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。
使用方法
1)对于悬浮细胞,离心收集细胞,对其充分清洗后,加入适量细胞重悬液重悬细胞制成单细胞悬液;对于贴壁细胞,先用胰酶消化细胞,再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。
2)取0.1ml单细胞悬液,按照1:1比例与0.1ml 0.4%台盼蓝染色液充分混匀,室温染色3~10min。
【注】:因台盼蓝具有细胞毒性,染色时间过久会导致部分死细胞染色,干扰计数。通常染色3min即可。
3)取少量上述染色细胞加入血细胞计数板,于显微镜低倍镜下计数,分别计算着色细胞(即损伤细胞和死细胞)和总细胞。
【注1】:用移液枪加染色细胞时,沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。
【注2】:1mm2方格内细胞数通常控制在20-50 cells,当细胞数超过200个,需重新调整稀释倍数。
4)按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比,
a,计算每ml细胞数目:Cells/ml=1mm2大方格内的平均细胞数×稀释倍数×104;【注】:此时的稀释倍数为:步骤2所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数
b,总细胞数目:Total cells=(Cells/ml)×最初制备单细胞悬液的总体积
c,细胞活力值:Viability(%)=(总细胞数-总着色细胞数)/总细胞数×100
【注】:通常情况,健康的对数期培养细胞,活细胞至少占到95%。
储存条件:室温,有效期2年使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
细胞质多聚腺苷酸结合蛋白3抗体英文全称Tissue factor pathway inhibitor 2B英文简称TFPI-2B检测范围2275nmol/L-400ng/mL
Complexin I/复合素1抗体英文全称Megalin英文简称Megalin检测范围2276nmol/L-
CD30抗体英文全称snail homolog 2英文简称SNAI2检测范围2277nmol/L-2000pg/ml
细胞角蛋白19,17,14,42,10抗体英文全称snail homolog 1英文简称SNAI1检测范围2278nmol/L-2000pg/ml
细胞角蛋白10抗体英文全称Topoisomerase Ⅱa英文简称TOP2a检测范围2279nmol/L-2000pg/mL
细胞角蛋白5抗体英文全称17 beta hydroxy steroid dehydrogenase 4英文简称17βHSD4检测范围2280nmol/L-8ng/mL
补体C9a抗体英文全称gamma glutamyl transpeptidase 7英文简称gGT7检测范围2281nmol/L-2000pg/mL
20号染色体开放阅读框141抗体英文全称C-Mer Proto Oncogene Tyrosine Kinase英文简称MERTK;Mer检测范围2282nmol/L-20ng/mL
20号染色体开放阅读框160抗体英文全称Sphingosine 1 Phosphate Receptor 1英文简称S1PR1检测范围2283nmol/L-80ng/mL
亲环蛋白(亲环素)40抗体英文全称Sphingosine 1 Phosphate Receptor 2英文简称S1PR2检测范围2284nmol/L-60ng/mL
21号染色体开放阅读框56抗体英文全称Sphingosine 1 Phosphate Receptor 3英文简称S1PR3检测范围2285nmol/L-20ng/mL
中性粒细胞杀菌蛋白BP30抗体英文全称Proteinase-3英文简称PRTN3检测范围2286nmol/L-40U/ml
Cappuccino蛋白抗体英文全称Fumarate hydratase, mitochondrial英文简称FH检测范围2287nmol/L-2000pg/mL
前列腺素过物合成酶3抗体英文全称phospho-Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1英文简称p-VEGFR1检测范围2288nmol/L-20ng/mL
补体因子H相关蛋白1抗体英文全称Opacity-associatedproteins英文简称OPAs检测范围2289nmol/L-40ng/mL
α-微管蛋白 多克隆抗体α-tubulin Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
Plant GST Rabbbit 多克隆抗体Plant GST Rabbbit Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
甲基CpG结合蛋白2多克隆抗体MeCP2 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
EF手性域家族成员D1 多克隆抗体EFHD1 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
FH 多克隆抗体FH Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
环氧化酶1 多克隆抗体COX1 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒Semen torreyae榧子探针法PCR鉴定试剂盒 中文名称 20号染色体开放阅读框152抗体别 名 C20orf152; Chromosome 20 open reading frame 152; CT152_HUMAN; dJ954P9.1; RP5-954P9.1; Uncharacterized protein C20orf152; Uncharacterized protein C20orf152 homolog.研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 68kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C20orf152
Rhizoma dioscoreae hypoglaucae粉萆薢探针法PCR鉴定试剂盒 中文名称 20号染色体开放阅读框165抗体别 名 C20orf165; Chromosome 20 open reading frame 165; CT165_HUMAN; dJ337O18.8; TSG23; Uncharacterized protein C20orf165.研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 24kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C20orf165
Fructus citri sarcodactylis佛手探针法PCR鉴定试剂盒 中文名称 20号染色体开放阅读框166抗体别 名 C20orf166; Chromosome 20 open reading frame 166; CT166_HUMAN; dJ353C17.1; RP3-353C17.2; Uncharacterized protein C20orf166.研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 12kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C20orf166
Poria茯苓探针法PCR鉴定试剂盒中文名称 20号染色体开放阅读框173抗体别 名 C20orf173; Chromosome 20 open reading frame 173; CT173_HUMAN; dJ477O4.4; FLJ25360; Hypothetical protein LOC140873; MGC138265; MGC138267; Uncharacterized protein C20orf173.研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 17kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C20orf173
Fructus rubi覆盆子探针法PCR鉴定试剂盒 中文名称 20号染色体开放阅读框24抗体别 名 chromosome 20 open reading frame 24; PNAS 11; Rab5 interacting protein; RIP5; Uncharacterized protein C20orf24; CT024_HUMAN.研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学蛋白分子量 predicted molecular weight: 15kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C20orf24
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文献和实验材料: 1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管; 2. 试剂:0.4%台盼蓝染液; 3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g; 4. 生理盐水:100ml; 操作步骤: 1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁
将细胞悬液与DNA结合的荧光染料混合,应用荧光显微镜观察以显示和计数伴有异常染色质的组织细胞。常用染料为丫啶橙,染色后可以检测整个细胞群中有多少细胞发生了凋亡,但不能区别活细胞和死细胞。因此将丫啶橙和溴化乙啶混合使用,根据两种染料的吸收情况可鉴定死、活细胞。 一、材料与试剂 100μg/ml丫啶橙或100μg/ml丫啶橙与100μg/ml溴化乙啶的混合物:分别用PBS配制(两种染色剂均系诱变物,操作时应十分小心)。 用完全RPMI-1640培养液配制的细胞悬液,浓度为5×
Hoechst 33258 Assay Kitfor Mycoplasma DNA 使用说明书 一、原理: 利用荧光染料(bisbenzimide,Hoechst33258)检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧
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