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AAV腺相关病毒包装服务(过表
企业认证
珠海舒桐医疗科技有限公司
滴度≥1×10E13 vg/ml;体积1ml
腺相关病毒包装服务
腺相关病毒(Adeno-associated virus)属于细小病毒科,Dependoparvovirus属,是目前发现的一类结构简单、无包膜的单链DNA缺陷型病毒,它的生命周期依赖于复制病毒的参与,如腺病毒和单纯疱疹病毒。野生型的腺相关病毒可以定点整合到人类第19号染色体的AAVS1位点,而重组腺相关病毒由于缺少整合和复制必需的两个基因而无法整合。因此,重组腺相关病毒主要以游离于染色体的附加体形式存在,并可长时间存在于非分裂细胞中。另外,腺相关病毒具有高组织特异性、良好的扩散性、低免疫原性、高安全性和稳定性。基于以上特点,重组腺相关病毒已经成为科研和基因治疗中具市场前景的病毒载体之一。
根据客户的个性化实验需求,舒桐生物提供优质的腺相关病毒包装服务。下面是具体服务内容(目录价仅为病毒包装费用):
*如您对上述服务感兴趣,请您点击“欢迎垂询”留下您的信息,我们将为您提供具体实验方案和项目价格。
腺相关病毒(AAV)简介
AAV结构
腺相关病毒的直径在20-26nm范围内,其直径为腺病毒的1/5,慢病毒的1/4,呈现20面体结构,对分裂细胞和非分裂细胞均可感染。
AAV基因组
腺相关病毒含有约4.7kb的单链线性DNA基因组。基因组两端为末端反向重复序列(ITR),对于病毒的复制和包装具有重要作用;中间基因组编码两类蛋白Rep和Cap,Rep蛋白参与病毒的复制和整合,Cap蛋白为病毒衣壳蛋白。衣壳包含三种类型的亚基VP1、VP2和VP3,比例为1:1:10 (VP1:VP2:VP3)。基于AAV的基因组结构,基因工程化的AAV载体删除了全部AAV蛋白编码序列,添加了外源基因的表达盒。唯一的病毒来源序列是ITR,它们是在病毒包装过程中指导AAV复制和包装所必需的。病毒编码序列的完全去除使AAV的包装能力最大化,并且有助于它们在体内递送时的低免疫原性和细胞毒性。
AAV血清型
现阶段研究人员已发现12种人类AAV 血清型(AAV1至AAV12)和 100多种非人类灵长动物AAV血清型。不同AAV血清型具有不同的衣壳蛋白空间结构、序列和组织特异性,因而其识别与结合的细胞表面受体也相应有很大差别,这也导致不同血清型转染的组织类型、细胞类型和感染效率也各不相同。下表是AAV1至AAV9的不同组织亲噬性。
AAV包装流程
舒桐科技可以提供从AAV质粒设计、构建、包装至表达分析的全套服务。不仅如此,舒桐科技也可以提供全面的AAV载体和表达系统,用于体内和体外表达human/mouse/rat ORFs,lncRNA、circRNA、shRNAs和CRISPR/gRNA。舒桐科技生产的AAV具有滴度高、纯度高和稳定性高的三高优点。下面是AAV从头合成的流程:
AAV滴度检测
舒桐科技的AAV病毒是通过用qPCR的方法来检测的病毒滴度,得到的结果为包装得到的病毒颗粒数。其原理是用腺相关病毒基因组特异性引物进行实时定量PCR。在定量曲线的线性范围内,Ct值与已知拷贝数质粒的Ct值的比值即为病毒基因组的初始拷贝数。
服务特色
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