CRISPR-Cas9敲除细胞系

精准基因编辑细胞株定制

随着ZFN、TALEN和CRISPR-Cas9技术的兴起，基因组编辑领域获得长远的发展。借助靶向基因组编辑工具，我们可以在基因组水平上精确编辑，设计产生全新的细胞株模型。定制精准编辑细胞株模型(genome edited cell line models)是体内研究基因功能的理想工具，已成为现代生物学在基因功能研究、肿瘤治疗和生物制药等领域重要的研究材料。基因组编辑技术（genome editing）是一种可以在基因组水平上对DNA序列进行改造的遗传操作技术。这种技术的原理是构建一个人工内切酶，在预定的基因组位置切断DNA，切断的DNA在被细胞内的DNA修复系统修复过程中会产生突变，从而达到定点改造基因组的目的。DNA修复系统主要通过两种途径修复DNA双链断裂（double-strand break,DSB）,即非同源末端连接（Nonhomologous end joining, NHEJ）和同源重组（homologous recombination, HR）。舒桐医疗科技有限公司不断探索基因组编辑在多种细胞系中的应用，已成功在数十种细胞系中实现了高效基因组编辑。基于慢病毒包装技术、转座子技术及 CRISPR/Cas9 靶向基因编辑技术，推出了精准编辑细胞株定制服务，包括基因敲除、定点基因敲入、点突变和定点基因大片段删除。

基因敲除细胞系

CRISPR-Cas9这种靶向特异的DNA内切酶切割目的DNA产生双链DNA断裂(DSB)，断裂的DNA招募细胞内DNA修复机器进行修复。在没有外源同源DNA序列时，细胞主要通过NHEJ途径将断裂的DSB位点连接起来。NHEJ介导的连接保真性不高，容易产生插入或者缺失(indel)，往往导致蛋白质编码基因的移码突变，进而产生基因敲除。

 

基因敲除细胞系交付材料

1. 靶基因敲除单克隆细胞系冻存细胞2支；
2. 实验测序数据；
3. 详细的实验结题报告（包括实验步骤，引物信息，实验结果等）

舒桐基因敲除技术优势

1. 自主研发优化的CRISPR基因编辑系统，更适用于哺乳动物细胞，有效提高编辑成功率；
2. 多样化的敲除策略，有效降低脱靶对敲除效果的影响；
3. 针对不同细胞系制定专属方案，有效提高编辑成功率；
4. 服务团队经验丰富，确保服务质量。

参考文献

1. Gao, X. et al. Hyperbranched poly(beta-amino ester) based polyplex nanopaticles for delivery of CRISPR/Cas9 system and treatment of HPV infection associated cervical cancer. J Control Release 321, 654-668, doi:10.1016/j.jconrel.2020.02.045 (2020).