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- 2025年12月31日
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- 技术资料
- 服务名称：
shRNA表达载体系统
- 规格：
P4252-100UN
技术服务详细描述
siRNA表达载体带有抗生素标记，可以在细胞中持续抑制靶基因的表达，持续数星期甚至更久。对于一个已知有效的siRNA序列（例如，经过siRNA合成方法筛选获得的），需要维持较长时间的基因沉默时，推荐使用shRNA载体系统。吉玛公司致力于提供最先进和最方便的shRNA相关工具，最近推出新一代shRNA表达质粒，一种高效即用型载体，该载体在细胞内可以持续产生siRNAs，从而达到持久抑制目标基因表达的目的。
吉玛公司 supersilencingTM shRNA表达载体系统
shRNA表达载体系统特点
- 产生短发夹型RNA（shRNA）来完成RNA干扰
- 方法简单、经济实惠，只需合成DNA寡核苷酸
- 克隆载体使用方便，带有筛选标记
- shRNA质粒稳定，易于操作
吉玛公司 supersilencingTM shRNA表达载体特点
1. 克隆载体具有两种形式的克隆酶切位点BamHⅠ和BbsⅠ。
BbsⅠ是特殊的限制性内切酶，产生非对称互补粘性末端，保证插入片断的方向正确，防止载体自体连接。
2．shRNA多种筛选标记可帮助建立稳定转染细胞系
Neo ：Neomycin耐受基因
Hygro ：Hygromycin B 耐受基因
GFP：：Neo：GFP报告基因和Kan/G418耐受基因
报告基因GFP可以帮助评价转染效率和指示RNAi发生位点
本公司共可构建8种RNAi Vector：
- pGPU6, pGPH1, pGPU6/Neo, pGPH1/Neo, pGPU6/Hygro, pGPH1/Hygro, pGPU6/GFP/Neo, pGPH1/GFP/Neo。pGPU6, pGPH1为无筛选标记RNAi载体
- pGPU6/Neo, pGPH1/Neo, pGPU6/Hygro, pGPH1/Hygro为含抗性筛选标记Neomycin和Hygromycin的RNAi载体
- pGPU6/GFP/Neo, pGPH1/GFP/Neo分别为含抗性筛选标记Neomycin同时可以表达GFP蛋白的RNAi载体
8种RNAi Vector GPU6, pGPH1, pGPU6/Neo, pGPH1/Neo, pGPU6/Hygro, pGPH1/Hygro, pGPU6/GFP/Neo, pGPH1/GFP/Neo 载体图谱
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文献和实验【1】 pSUPER vector http://www.oligoengine.com/pSUPER_New/pSUPER_Main2.html 【2】 pSilencer http://www.ambion.com/catalog/ProdGrps.html?fkApp=25&fkSubApp=145 【3】 psiRNA VECTOR http://www.invivogen.com/siRNA/psiRNA.htm 【4】 pGE-1 http://www
pl198242 请问shRNA表达载体在真核细胞中表达，一定要有真核表达的复制起始点么？ 如果只有PUC ori ，但是还有U6 启动子，是否就可以在真核细胞中表达shRNA了呢？ 这和f1 ori有什么关系么？ 由于对这方面了解很少，所以希望广大战友能予以帮助解答，谢谢！ Fasta921 复制起点与启动子层面不同： PUC复制起点貌似原核复制起点啊，比如你转染前要获得大量的质粒，那么pUC origin 能保证
得到日益广泛的应用。 2.昆虫细胞表达系统 杆状病毒表达系统是目前应用最广的昆虫细胞表达系统，该系统通常采用目宿银纹夜蛾杆状病毒(AcNPV)作为表达载体。在AcNPV感染昆虫细胞的后期，核多角体基因可编码产生多角体蛋白，该蛋白包裹病毒颗粒可形成包涵体。核多角体基因启动子具有极强的启动蛋白表达能力，故常被用来构建杆状病毒传递质粒。克隆入外源基因的传递质粒与野生型 AcNPV共转染昆虫细胞后可发生同源重组，重组后多角体基因被破坏，因而在感染细胞中不能形成包涵体，利用这一特点
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