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病理学油红O脂肪染色实验
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上海达为科生物科技有限公司
油红O脂肪染色实验
油红O染色是鉴定间充质干细胞向成脂细胞分化的一个重要指标。用特定的成脂诱导培养基(货号:CTCC-JD003)培养一段时间后 ,间充质干细胞可分化为成脂细胞,并在细胞中形成脂滴。油红O属于偶氮染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于细胞中的脂滴。当染料加入细胞中,染料则离开染液而溶于细胞内的脂滴中,使细胞内的脂滴星红色或橘红色。
油红O工作液制备:
油红染色液与染色稀释液按照3:2的比例进行稀释,混匀后室温静置10min,滤纸过滤;
移除孔内培养基,每孔加入2ml洗涤液1号静置1min后移除,洗涤2次;
每孔加入2ml固定液,37°C (或室温)固定30min ;
移除固定液。每孔加2ml洗涤液1号冲洗,洗涤2次;
每孔加入油红O工作液2ml,37°C (或室温)染色10-20min ;
每孔加入洗澡液3号2ml,快速移除,根据染色背景情况可重复1-2次;
每孔加洗涤液2号2ml,洗2次后显微镜下观察。
实验结果:脂滴呈橘红色至鲜红色,细胞核呈深蓝色。
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