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充足
- 保质期:
2年
- 供应商:
汉恒生物科技(上海)有限公司
- 保存条件:
-20℃保存,冰袋运输
- 规格:
50T
实验原理
CCK-8细胞增殖检测试剂盒是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的快速灵敏度试剂盒。
WST-8属于MTT的升级产品,工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)(图1-2) ,其颜色的深浅与存活细胞数目的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450 nm波长处测定OD值,可以间接反映活细胞的数量。
CCK-8法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

(1)细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100 μl/孔)。将培养板放在培养箱中预培养一段时间(37℃, 5% CO2)。
2、向每孔加入10 μl CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
5、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μl-0.1 M的HCl溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
(2)细胞增殖-毒性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100 μl)。将培养板放在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。
2、向培养板加入10 μl不同浓度的待测物质。
3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
4、向每孔加入10 μl CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μl - 0.1M的HCl溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
注:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
CCK-8法主要优势
· 操作简便:液体试剂即开即用,一步添加,无需配制、无需有机溶剂溶解
· 灵敏度高:线性范围广,检测灵敏度高,重复性好
· 细胞毒性低:WST-8 不进入细胞,检测完成后更换新培养液,细胞可继续用于后续实验
· 稳定性好:培养液中酚红和血清不影响检测结果
· 适用范围广:可用于大规模、高通量样品检测
CCK-8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较
|
检测方法 |
MTT法 |
XTT法 |
WST-1法 |
CCK法 |
|
甲臜产物的水溶性 |
差(需加有机溶剂溶解后再检测) |
好 |
好 |
好 |
|
产品性状 |
粉末 |
2瓶溶液 |
溶液 |
1瓶溶液 |
|
使用方法 |
配成溶液后使用 |
现配现用 |
即开即用 |
即开即用 |
|
检测灵敏度 |
高 |
很高 |
很高 |
高 |
|
检测时间 |
较长 |
较短 |
较短 |
最短 |
|
检测波长 |
560-600nm |
420-480nm |
420-480nm |
430-490nm |
|
细胞毒性 |
高,细胞形态完全消失 |
很低,细胞形态不变 |
很低,细胞形态不变 |
很低,细胞形态不变 |
|
试剂稳定性 |
一般 |
较差 |
一般 |
很好 |
|
批量样品检测 |
可以 |
非常适合 |
非常适合 |
非常适合 |
|
便捷程度 |
一般 |
便捷 |
便捷 |
非常便捷 |
注:1、酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰;
2、本试剂盒细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。
产品货号与规格
| 货号 | 规格 | 体积 | 参考价格(元) |
| HB-CCK-8-50T | 50T(试用装) | 5 mL | ¥60 |
| HB-CCK-8-500T | 500T | 5 mL | ¥625 |
| HB-CCK-8-1000 | 1000T | 10 mL | ¥1,125 |
| HB-CCK-8-3000 | 3000T | 30 mL | ¥2,500 |
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文献和实验[1]Chen H, Li M, Xie F, et al. A novel protein cPFKFB4 encoded by hsa_circ_0065394 strengthens PKM2-mediated glucose metabolic reprogramming to facilitate pancreatic cancer progression under hypoxia. Mol Cancer. 2025;24(1):285. Published 2025 Nov 11.
(杂志:Molecular Cancer,IF=33.9,重庆大学重庆总医院)
[2]Zhou J, Zhang L, Peng J, et al. Astrocytic LRP1 enables mitochondria transfer to neurons and mitigates brain ischemic stroke by suppressing ARF1 lactylation. Cell Metab. 2024;36(9):2054-2068.e14.
(杂志:Cell Metabolism,IF=25.083,中南大学湘雅第三医院)
[3]Sun X, Wu J, Liu L, et al. Transcriptional switch of hepatocytes initiates macrophage recruitment and T-cell suppression in endotoxemia. J Hepatol. 2022;77(2):436-452.
(杂志:Journal of Hepatology,IF=18,山东大学齐鲁医院)
[4]Wang D, Tang L, Chen M, et al. Nanocarriers Targeting Circular RNA ADARB1 Boost Radiosensitivity of Nasopharyngeal Carcinoma through Synergically Promoting Ferroptosis. ACS Nano. 2024;18(45):31055-31075.
(杂志:ACS nano,IF=15.8,中南大学湘雅医院)
[5]Zuo Y, Hou Y, Wang Y, Yuan L, Cheng L, Zhang T. Circadian misalignment impairs oligodendrocyte myelination via Bmal1 overexpression leading to anxiety and depression-like behaviors. J Pineal Res. 2024;76(1):e12935.
(杂志:Journal of Pineal Research,IF=10.3,山东大学齐鲁医院)
一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
还有就是用Invitrogen公司的CFSE细胞增殖流式检测试剂盒也可,我觉得。 qing0831 可以用流式细胞术检测,我经常做这方面的实验,可以交流一下,手机:15921609870 QQ:57325595 bigbang_0_0 cologenic assay bigbang_0_0 cologenic assay nmmxq Brdu incorporation assay
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