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一:背景介绍
名称: SNCG; γ突触核蛋白
描述: 由human γ-synuclein基因(SNCG)编码的蛋白-γ突触核蛋白(γ synuclein)为天然无折叠蛋白,是公认的乳腺癌分子标记物,且在多种肿瘤中检测到高表达.其对乳腺癌细胞有促生长和转移的作用,可干扰细胞有丝分裂开关激酶与微管启动蛋白的结合,促使肿瘤细胞耐受抗微管化疗药物.在体外试验中使用干扰γ突触核蛋白功能的多肽后,可提高化疗效果.另外还发现γ突触核蛋白能与热激蛋白(HSP)结合,进而激活雌激素受体α(ER-α)的转录活性,可能为激素相关性肿瘤增殖机制之一
滴度: 1x1010 PFU/ml ;体积: 200ul ; 保存buffer: DMEM with 2% BSA & 2.5% Glycerol
说明:含病毒载体构建、病毒包装、细胞转染、建系(流式分选或者药物筛选)
参考文献:
四、病毒载体构建时间表
病毒载体构建时间表
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项目
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步骤
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时间
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前期准备工作
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实验方案设计
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1-3工作日
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原始质粒鉴定
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载体构建
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引物设计及
引物合成
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3-6工作日
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PCR,回收,纯化
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1工作日
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酶切,回收,纯化
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1工作日
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连接,转化
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1工作日
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提质粒,酶切鉴定
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2-3工作日
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测序
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3-5工作日
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总计
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11-18工作日
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病毒载体构建
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连接及转化
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1工作日
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提质粒,酶切鉴定
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2-3工作日
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测序
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3-5工作日
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总计
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6-10工作日
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病毒包装、扩增
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细胞准备
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1-2工作日
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质粒线性化及转染
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1工作日
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包装
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12-15天
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扩增
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3-4天
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大规模扩增
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5-10天左右
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总计
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22-32工作日
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总计
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40-63工作日
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SNCG干扰慢病毒细胞转染实验
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