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    首页 / 试剂 / 生物化学 / 【试用装】CCK-8细胞增殖检测试剂盒50T
    【试用装】CCK-8细胞增殖检测试剂盒50T

    【试用装】CCK-8细胞增殖检

    测试剂盒50T
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    价格: ¥20
    品牌: 汉恒生物 已认证
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    距离结束
    xx xx xx xx
    试用份额:
    50
    试用说明:
    1、试用品规格:50ul
    2、运费: 包邮 ;包邮
    3、联系时间: 试用活动结束后的7天内
    4、申请要求: 每个实验室只能申请 1 次
    5、其他说明: 无
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        产品简介
         
        CCK试剂盒是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8属于MTT的升级产品,工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)(图1-2) ,其颜色的深浅与存活细胞数目成正比。使用酶标仪在450 nm波长处测定OD值,可以间接反应活细胞的数量。
         
        CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

        图1. WST-8和WST-8甲攒结构图

        图2. CCK-8检测细胞活性原理
         
         
        货号 产品名称 产品规格 产品包装 价格
        HB-CCK8-1 CCK8细胞增殖试剂盒 100次 1ml 188元
        HB-CCK8-2 CCK8细胞增殖试剂盒 500次 5ml 625元
        HB-CCK8-3 CCK8细胞增殖试剂盒 1000次 10ml 1125元
        HB-CCK8-4 CCK8细胞增殖试剂盒 3000次 30ml 2500元
        HB-CCK8-5 CCK8细胞增殖试剂盒 10000次 100ml 6250元
        注:4℃干燥避光保存,有效期一年(推荐)。-20℃干燥避光保存,有效期二年。
          
         
         
         
        产品优势
         
        表1 CCK法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较
        检测方法 MTT法 XTT法 WST-1法 CCK法
        甲臜产物的水溶性 差(需加有机溶剂溶解后再检测)
        产品性状 粉末 2瓶溶液 溶液 1瓶溶液
        使用方法 配成溶液后使用 现配现用 即开即用 即开即用
        检测灵敏度 很高 很高
        检测时间 较长 较短 较短 最短
        检测波长 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
        细胞毒性 高,细胞形态完全消失 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变 很低,细胞形态不变
        试剂稳定性 一般 较差 一般 很好
        批量样品检测 可以 非常适合 非常适合 非常适合
        便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷
          注:1、酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰;
          2、本试剂盒细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。
         
         
        毒性测试
         
        1、在96孔板中配置100 μl的细胞悬液。将培养板放在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。
        2、向培养板加入10 μl不同浓度的待测物质。
        3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
        4、向每孔加入10 μl CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
        5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
        6、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
        7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μl 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
        注:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
         
         
        细胞活性检测
         
        1、在96孔板中接种细胞悬液(100 μl/孔)。将培养板放在培养箱中预培养一段时间(37℃, 5% CO2)。
        2、向每孔加入10 μl CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
        3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
        4、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
         
        5、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μl 0.1 M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
         
         
         
        注意事项
         
        1)建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
        2)有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基页面下加,容易产生气泡,会干扰OD值读数。
        3)白细胞可能需要培养较长时间。
        4)当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液。
        5)如果没有450 nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm之间的滤光片,但是450 nm滤光片的检测灵敏度高。
        6)培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
         
        活力计算:
        细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100
        A(加药):具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
        A(空白):具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
        A(0加药):具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度

         
        *细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力 
         
        注:申请后无特殊情况7天工作日内发货
      温馨提示:不可用于临床治疗。

      风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。

      资料下载:

      CCK8细胞增殖检测试剂盒操作指南.pdf 附件下载 (下载 16 次)

    • 申请记录
    • 用户试用体验
      lich******cess 2023-09-03

      试用 研究方向: 分子生物学

      试用产品情况:非常好

      产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):简单好用

      实验结果:满意

      后续是否有购买需求:有

      dxy_****d2o9 2023-08-14

      研究需要。未来将会在发表的论文上注明试剂来自丁香园^_^

      试用产品情况:产品的数值可靠,随样品的变化而显色,且较快速

      产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):试用装一支的量只够用四个孔,量不足

      实验结果:还可以,误差较少

      后续是否有购买需求:有

      wei*****521 2023-08-09

      想试用一下,看看效果 研究方向: 索拉非尼耐药

      试用产品情况:使用cck8做了2次药物ic50检测

      产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):比之前用的mtt试剂要简单

      实验结果:结果不错

      后续是否有购买需求:有

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