SARS-CoV-2 Spike假病毒|新冠病毒 2019-nCoV 假病毒
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    • 英文名

      SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Pseudovirus

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      北京义翘神州科技股份有限公司

    • 保存条件

      -80℃

    • 规格

      200 µL

    SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒简介
    使用HIV-1(人类免疫缺陷I 型病毒)为基础载体转染293细胞后,包装成SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒,表面表达SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike蛋白,并携带有荧光素酶报告基因,可用于侵染过表达ACE2的细胞,荧光素酶在细胞内表达。此假病毒无自主复制能力,具有安全性高、可操作性强等特点。
    SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒检测参数
    (1)信号值:假病毒感染细胞(293T-ACE2)后48-72小时,Luciferase发光值可达106 RLU (Relative Light Unit)。
    (2)蛋白含量:SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike S1蛋白含量860 ng/mL。
    (3)拷贝数:1010 virus copies/mL。
    SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒应用领域

    (1)中和抗体/血清检测(需使用过表达ACE2的细胞株);

    SARS-CoV-2 Spike假病毒|新冠病毒 2019-nCoV 假病毒

    中和检测原理示意图

    中和原理1:抗体直接封闭Spike RBD和ACE2的结合,导致假病毒无法进入细胞
    中和原理2:抗体不直接封闭Spike RBD和ACE2的结合,但抗体与Spike结合后产生的空间位阻妨碍了RBD与ACE2的结合,或者抗体的结合阻止了S1和S2亚基的切割,从而干扰膜融合,导致假病毒无法进入细胞

    (2)疫苗保护性评估、抗病毒抑制剂筛选等。

    SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike假病毒使用指导
    (1)中和检测:假病毒与抗体或血清37℃共孵育1h后侵染过表达ACE2的细胞株,48-72h后使用化学发光仪检测Luciferase发光值,根据Luciferase发光值计算中和抑制率。
    中和检测原理示意图——等待替换
    (2)标准品:使用裂解液对假病毒进行处理后,可作为标准品用于ELISA等检测。
    (3)保存条件:-80℃,自收到之日起有效期1年。
    (4)注意事项:建议在BSL-2级实验室使用;经验证此假病毒更适用于侵染过表达ACE2的细胞株,而在非过表达ACE2的细胞株上效果不理想(例如veroE6、293T等)

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    1, Gao J, et al. Oroxylin A is a severe acute respiratory syndrome coronavirus 2-spiked pseudotyped virus blocker obtained from Radix Scutellariae using angiotensin-converting enzyme II/cell membrane chromatography.Phytotherapy research : PTR, PubMed ID: 33587321
    2, Hu S, et al. Three salvianolic acids inhibit 2019-nCoV spike pseudovirus viropexis by binding to both its RBD and receptor ACE2.Journal of medical virology, PubMed ID: 33580518
    3, Li X, et al. Dependence of SARS-CoV-2 infection on cholesterol-rich lipid raft and endosomal acidification.Computational and structural biotechnology journal, PubMed ID: 33850607
    4, Wang Z, et al. SARS-CoV-2 treatment effects induced by ACE2-expressing microparticles are explained by the oxidized cholesterol-increased endosomal pH of alveolar macrophages.Cellular & molecular immunology, PubMed ID: 34983944
    5, Li Z, et al. GSK3326595 is a promising drug to prevent SARS-CoV-2 Omicron and other variants infection by inhibiting ACE2-R671 di-methylation.Journal of medical virology, PubMed ID: 36114164
    6, Qin Z, et al. Discovering covalent inhibitors of protein-protein interactions from trillions of sulfur(VI) fluoride exchange-modified oligonucleotides.Nature chemistry, PubMed ID: 37653229
    7, Yu W, et al. Biosensor-based active ingredient recognition system for screening potential small molecular Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 entry blockers targeting the spike protein from Rugosa rose.Biomedical chromatography : BMC, PubMed ID: 39126351
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