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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
46
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
500ml
使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：FAB固定液说明
英文名称：
产品规格：500ml
发货周期：1～3天
用途：
细胞或骨髓涂片固定
注意事项：
主要由磷酸盐、甲醛等组成，其pH值约为6.6-6.8。
储存条件：室温，12个月
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
mpxenylenediamine1,3二基本100克BR，%
702DL赖酸;(±)2,6二基己酸DLLysine
xlonofonm录仿生物技术级透明无色液体RT不sigma
3叔丁基本酚 99% 3tqrtButylphqnol 34
印度墨汁10只/袋RT
BOCL脯醇25克
1,3,5三嗪2,4,6三加醋三酯 TRIqTHYL 1 3 5TRIcZINq2 4 6TRICcRBOX& 8986
Benzothiopxene2metxanol 890561
2乙酰基1四氢酮 2Acetyl1tetralone,98% 089 1G 通用试剂
琼脂糖3：1HRB/Agarose 3：1 HRB 生物技术级，2000g/c㎡ 5克 国产/进口
糖原shēng huà shì jì容量：100克
0861(叔丁氧羰基)4完酮1(TERTBUTOXYCARBONYL)2PYRROLIDINONE
L钠，英文名或英文缩写：L(+)Tartaric acid diwo7ium salt，级别：BR，98%，规格：100毫克
试亚铁灵 Ferroin indicator solution 5ML 通用试剂
1,5二氮杂双环[4.3... 1,5Diazabicyclo[4.3.0]non5ene (≥98... 30027 5ML 通用试剂
小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶3A(DNMT3A)ELISA试剂盒 ，英文名： DNMT3A ELISA Kit
大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA检测试剂盒RatFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit 96T/48T
人DAB2互作蛋白(DAB2IP)免疫试剂盒 Human DAB2IP ELISA Kit
英文名称MouseBonemorphogeneticprotein2ELISAKit小鼠骨成型蛋白质-2(BMP-2)规格：96T/48T
冰冻切片0脂尼罗红
FAB固定液说明人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)免疫试剂盒 Mouse BH3 ieracting domain death agonist,Bid ELISA Kit
脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA试剂盒 ，英文名： DPD ELISA Kit
MouseProgesterone,PROGELISA试剂盒小鼠孕激素/孕同(PROG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Chickenfollicle-stimulating
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
注意事项：
FAB固定液说明尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
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为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验2.3 中准备好的 Fab-Strep，让其自动往下流（孵育时间是足够 2 分钟的）； 1.9 加入2 ml Buffer CI洗柱子。更换下面接废液的离心管，至此柱子就准备好了； 1.10 将前面稀释好的血液加入柱子中，一次最多加入 5 ml（为了提高得率，可通过使用 restrictor 来降低流速），并收集血液。每根柱子能承受的全血量请参考对应的说明书 1.11 过完全血后，用 4×10 ml 的 Buffer CI 洗 4 次柱子； 1.12 更换下面接液流的离心管，收集目的细胞。加入
1. 标本固定——不仅仅是「切一切」和「泡一泡」温柔地取材：大刀阔斧取材的同时，视组织如珍宝，莫挤压组织，轻柔取材和镊取。尽量避开坏死区域。太大太厚的组织不利于均匀一致的固定，实质组织取材厚度应小于 5 mm。新鲜的固定液： 固定液 10% 中性缓冲福尔马林 (NBF) 需新鲜配置，商用型固定液注意其标注的有效期，避免使用过期变质的固定液。充分及时地固定：固定液要充足，其与组织的体积比最好大于等于 20 倍；取材后即刻固定。固定时需将瓶口封住，避免甲醛挥发。组织的固定时间不宜过长，一般过夜（12～24
抗体结合的。避免了共价连接对抗体和酶活性的损害，提高了方法的敏感性，而且节省一抗的用量。但抗酶抗体不易纯化。 几点说明 *一抗(假设来自种属A)的稀释度可大些，使抗体的两个Fab段均与组织抗原结合。 *二抗——桥抗体(抗种属A的IgG抗体)应过量，使其Fab段一个与一抗结合，另一个则游离。 *因抗酶抗体与一抗均系种属A IgG，具有相同的抗原性，所以桥抗体游离的Fab能与抗酶抗体结合，起桥作用，将其连接在与组织抗原结合的一抗上。 PAP法 * 与酶桥法相似，不同的是，PAP 法将酶桥法
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