TUNEL凋亡检测试剂盒（显色法）

用于检测单个细胞水平凋亡的非同位素试剂盒。易于检测凋亡形态。该试剂盒可以识别石蜡包埋的组织切片、组织冷冻切片或通过片段末端标记（FragEL）的DNA固定在玻片上的细胞制剂中的凋亡核。末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）可结合响应凋亡信号而产生的DNA片段的暴露末端，并催化生物素标记的和未标记的脱氧核苷酸的模板依赖性加成。使用链霉亲和素-辣根过氧化物酶（HRP）缀合物对生物素化的核苷酸进行检测。可与标记的样品反应，在DNA断裂位点产生不溶的有色产物。用甲基绿复染有助于对正常细胞和凋亡细胞的形态进行评估和表征。

组分: 复染、蛋白酶K、平衡和标记缓冲液、TdT酶（货号PF060）、终止缓冲液、封闭缓冲液、50X缀合物、DAB、阳性和阴性对照载玻片、H₂O₂/尿素片、甲基绿复染剂、和用户操作步骤。

原理: Calbiochem TdT-FragEL DNA碎片检测试剂盒是一种非同位素系统，可用于标记石蜡包埋的组织切片、组织冷冻切片以及固定在载玻片上的细胞制剂中凋亡核中的DNA断裂。

制备说明: 1.阴性对照样品的获得通过在反应步骤中用dH₂O代替反应混合物中的TdT或在标记步骤中将样品保存在1X反应缓冲液（带盖玻片）中，可以获得特定样品的阴性对照。按照说明进行所有其他步骤。这可以控制内源性过氧化物酶和非特异性结合物的结合。非细胞凋亡对照也至关重要，因为细胞和组织从切除、固定和加工步骤的最开始就开始发生凋亡。固定或常规机械操作的延迟可能会导致不必要的DNA断裂，这可能被误认为是凋亡。2.阳性对照样品的获得：蛋白酶K处理后，在1X TBS/1 mM MgSO₄中用1 µg/µl DNase I覆盖整个样本，即可获得特定组织样品的阳性对照。在室温下孵育20分钟。按照说明进行所有其他步骤。这将使正常细胞中的DNA断裂。可以观察到DNase处理过的细胞的细胞质和核的DAB染色。

储存及稳定性: 收到货后将试剂盒的全部内容物储存在-20°C的无霜冰箱中。初次融化后，将终止缓冲液和甲基绿复染液在室温下保存，将封闭缓冲液在4°C下保存。但是，重新冷冻这些组分可能并不会影响它们的性能。

其他说明
Xiao, D. and Bullock, R. 1996.J. Neurosurgery85, 655.
Gu, Y., et al. 1994.Endocrinology135, 1272.
Gavrieli, Y., et al. 1992.J. Cell Biol.119, 493.
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Martin, S.J., et al. 1990.J. Immunology145, 1859.
Wyllie, A. H. 1980.Nature284, 555.
Kerr, J. F. R., et al. 1972.Br. J. Cancer26, 239.

1. 试剂盒组分齐全：含阳性/阴性对照细胞片、蛋白酶K 、显色试剂、检测缓冲液、复染用甲基绿（可选）等，即买即用，无需准备其它试剂，市场上仅此一家；
2. 利用生物素亲和素高结合反应：亲和常数为10¹⁵mol-1，至少是抗原抗体亲和常数的10000倍，灵敏度高；
3. 底物显色系统采用HRP和DAB反应：相较于AP与BCIP/NBT显色系统，比活更高、特异性更强、分子量小（40kD）、反应更快、稳定和作用底物范围广且价格便宜 ；
4. 检测样本类型多样：组织冰冻切片，石蜡切片，细胞涂片（悬浮细胞）；
这两种试剂盒在国内备有现货，经众多用户使用。此外，提供中文说明书,方便用户操作。