外泌体提取纯化试剂盒（组织、细

Umibio 助力科研，Umibio 的外泌体提取试剂盒针对不同样本类型提供了试用装，包括细胞上清、血液、组织、尿液、乳液、体液等等，有发表文献把关，实验效率有保障～Umibio 更是把一系列提取过程拍成了视频，让你少走弯路，快速上手。目前使用 Umibio 外泌体提取试剂盒发表的文献已有 300 多篇，提取试剂盒以及周围试剂产品，都很好地应用于后续的下游实验，好产品经得起实践检验。

产品名称：外泌体提取纯化试剂盒（组织）

产品用途：适用于组织，可以提取 2g 组织样品

保存方式：Solution A2（-18℃保存）、Solution B2常温18-25℃；运输条件：常温+低温；

产品描述：

外泌体是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡（30-150 nm），在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能，在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子；然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。

外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒，而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。宇玫博生物自主开发的外泌体提取纯化试剂盒，组分经过优化处理，适用于多种组织的外泌体提取（包括脑、心、肝、肺、肌肉、脾、淋巴结、胸腺、胚胎、肿瘤等组织），可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒，可用于电镜分析、NTA粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等。

产品组分

产品优势：

涵盖组织、细胞上清、血清血浆、乳液、尿液以及其他体液等多种样本；针对不同样本，预处理、提取、纯化试剂做差异化配方；

样品处理量大，可达同类产品5倍以上；

外泌体可用于细胞共孵育和组学研究；

专注于外泌体提取和配套试剂盒研发；

价格便宜，为您大规模研究节省成本；

数百篇参考文献让您放心使用无忧购；

质控数据：

牛奶                                    细胞上清                                  血清

精彩操作视频

包含了丰富全面的实操教学视频，除了组织、细胞上清液、血液、尿液等样本外泌体提取纯化操作视频教学外，还提供了超滤浓缩、 MSC 培养、肿瘤/T 细胞培养操作视频，现在扫描下方二维码即可免费查看。

实验操作规程：

一、 样品预处理

1、 提前将Solution A2置于4℃或冰上融化并混匀；

2、 组织剪碎：在消毒器皿（置于冰上）中将组织剪切成1 mm³～3 mm³左右的碎组织块 （剪切得越小越好）；

3、 组织碎片清洗：将组织碎块转移至离心管中，加入不少于10倍体积的1×PBS缓冲液，振荡混匀后300 ×g（~2,000 rpm*）离心10 min，弃上清；

*为约7 cm有效离心半径的小离心机换算（≤2 mL离心管），下同。

4、 组织消化：按照每0.1 g组织块加入1 mL Solution A2的比例，将组织块与Solution A2混匀在2 mL离心管中，横放于37℃、80 rpm恒温摇床上孵育20 min（或在37℃水浴锅中孵育30 min，每5 min混匀一次）；

5、 离心取上清：反应液以8,000 ×g（~10,100 rpm）离心10 min，将上清液转移至新的离心管中；

6、 离心去杂质碎片：将离心上清液转移至新的离心管中，于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm）离心10 min，去除样品中的杂质碎片；

7、 上清液转移：去除杂质碎片的上清液转移到新离心管中。

二、 提取外泌体

1、 加Solution B2试剂：上一步获得的上清液中加入1/4体积的Solution B2试剂；

2、 溶液混合：将离心管盖紧，通过涡旋振荡器混匀1 min，再放置于4℃静置1 h以上（注：增加静置时间可提高外泌体得率，但不可超过24 h）；

3、 沉淀外泌体：取出装有混合液的离心管于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm）离心30 min，弃上清，沉淀中富含外泌体颗粒（尽可能吸尽上清液）；

4、 再次离心：将含有沉淀的离心管再次于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm）离心2 min，弃上清（注：尽可能吸尽上清液）；

5、 外泌体重悬：取合适量的1×PBS均匀吹打离心沉淀物，待其溶解后，将重悬液转移至新的1.5 mL离心管中（建议每0.1 g组织用200 μL左右1×PBS重悬）；

6、 收获外泌体颗粒：将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm）离心2 min，保留上清液，其中富含外泌体颗粒（注：若沉淀较多，可12,000 ×g，2 min离心多次至无明显沉淀，每次取上清液）。

三、 纯化外泌体

1、 纯化外泌体：将收获的外泌体颗粒粗品转入Exosome Purification Filter（EPF柱）上室中，于4℃以3,000 ×g（~6,200 rpm）离心10 min，离心后收集EPF柱管底的液体，此液体即为纯化后的外泌体颗粒（注：EPF柱不可重复使用）；

2、 外泌体的保存：纯化后的外泌体以合适体积进行分装冻存于-80℃低温冰箱中，以备后续实验使用。

注意：

本产品仅用于生命科学研究，不得用于医学诊断及其他用途！

常见问题及解决方法：

一、 产品试剂保存问题：

1、 Solution A2使用前后应保存于-18℃条件下，建议分装后使用，应避免反复冻融；

2、 Solution B2始终保存在室温条件下即可，温度过低可能使该溶液中出现白色结晶，且难以复溶（需要高温），少量沉淀不影响提取效果。

二、 纯化柱使用问题：

1、 一般情况下，每个样品按照说明书操作，“3,000 ×g（~6,200 rpm）离心10 min”即可一次性纯化完毕。如果上柱中仍有液体残留，将纯化柱转换方向放置于离心机中（区别于上一次放置方向即可），再次重复离心；

2、 若通过上述操作，上柱中仍有较多液体残留，请将上柱中的液体转移至新的纯化柱中，继续重复离心操作，直至上柱液体全部转移至下柱中。

三、 外泌体得率问题：

一般情况下，0.1 g组织样品（以心肌组织为例）可以提取出100~200 μg外泌体（5E+9~1E+10 Particles总量），因不同组织外泌体含量不同，得率会有一定差异。

相关发布文献参考（部分节选）

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Loss of cancer-associated fibroblast-derived exosomal DACT3-AS1 promotes malignant transformation and ferroptosis-mediated oxaliplatin resistance in gastric cancer,

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