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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
43
- 英文名：
BJ5183 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ul*50
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| BJ5183 感受态细胞100ul*50 | 100ul*50 | 克隆感受态细胞 |
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
CADM3 Others Human 人 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人细胞裂解液 (阳性对照) 吲达帕胺Indapamide质量规格：>99%,EP6.0,BR
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A吲达帕胺（标准品）Indapamide质量规格：HPLC>98%,标准品
CLEC5A Others Cynomolgus 食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 帕醇(标准品)Iopamidol质量规格：HPLC>98%,USP
角膜内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)帕醇Iopamidol质量规格：>98%,USP
Ec109细胞，食管癌细胞 人卵巢癌细胞,COC1细胞 人脉络丛内皮细胞cDNAHCPEC cDNA盐酸洛哌丁胺Loperamide HCl质量规格：>98%,BR
人胚肺细胞VA13细胞;WI-38 VA13亚系2RA 人直结肠平滑肌细胞完全培养基 100mL醋酸布舍瑞林Buserelin Acetate质量规格：>98%,BR
人结肠平滑肌细胞HCSMC司骨化醇Secalciferol质量规格：>98%,BR
NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 25-羟甾醇25-Hydroxyvitamin D2质量规格：>98%,BR
小型猪肾细胞;MPK利拉鲁肽Liraglutide质量规格：>95%,BR
H125细胞，人肺癌细胞 小鼠脂肪细胞,L13T3细胞 CM-R111大鼠雪旺氏细胞完全培养基100mLMK4827 (Niraparib)MK-4827 (Niraparib)质量规格：>98%,BR
异银杏双黄酮 HPLC≥98% 20mg MAPK蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5
异泽兰黄素 HPLC≥98% 20mg MAYER苏木素复染试剂盒50
异紫花前胡内酯 HPLC≥98% 10mg McCOY’S5A培养基1/10升(片剂)
异紫堇定碱 HPLC≥98% 20mg MEM培养基1/10升(片剂)
益母草苷 HPLC≥98% 20mg MGMT基因甲基化程度定量分析试剂盒20
薏苡素 HPLC≥98% 20mg MHCELISA试剂盒鱼类主要组织相容性复合体规格：96T/48T
茵芋苷 HPLC≥98% 20mg MHPG高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20
茵芋碱 HPLC≥98% 20mg Michel固着液50毫升
淫羊藿苷I HPLC≥98% 20mg MLH1基因甲基化程度定量分析试剂盒20
淫羊藿素 HPLC≥98% 20mg MMLV(H点突变)2500U
BJ5183 感受态细胞100ul*50MAPK蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5 异银杏双黄酮 HPLC≥98% 20mg
MAYER苏木素复染试剂盒50 异泽兰黄素 HPLC≥98% 20mg
McCOY’S5A培养基1/10升(片剂) 异紫花前胡内酯 HPLC≥98% 10mg
MEM培养基1/10升(片剂) 异紫堇定碱 HPLC≥98% 20mg
MGMT基因甲基化程度定量分析试剂盒20 益母草苷 HPLC≥98% 20mg
MHCELISA试剂盒鱼类主要组织相容性复合体规格：96T/48T 薏苡素 HPLC≥98% 20mg
MHPG高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20 茵芋苷 HPLC≥98% 20mg
Michel固着液50毫升 茵芋碱 HPLC≥98% 20mg
MLH1基因甲基化程度定量分析试剂盒20 淫羊藿苷I HPLC≥98% 20mg
MMLV(H点突变)2500U 淫羊藿素 HPLC≥98% 20mg
BJ5183 感受态细胞100ul*50操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
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文献和实验Generation of Recombinant Adenovirus Using the Escherichia coli BJ5183 Recombination System
here uses homologous recombination machinery of Escherichia coli BJ5183 to construct plasmids used in generation of adenoviral vectors. With this method, no ligation steps are involved in generating the plasmids, and any region of the adenoviral genome
1、准备工作1.1 将水浴箱内部清洁干净后放入无盐水至标示刻度。1.2 将盛有所需溶液的1000ml烧杯放入水浴箱中。1.3 将吊篮悬挂于金属支架上，调节水位高度，使吊篮上升时筛网在水面下25mm处，下降时距底25mm，然后取下吊篮备用。2、正常工作2.1 插上电源，然后按电源开关接通电源，电源指示灯亮，仪器启动。2.2 时间预置仪器开机后，系统处于初始状态，自动定时系统自动预置为15秒，时间数码管显示窗显示时间数值为015。如果需要改变预置时间数值，则可以按一下时间键，预置时间数值变为20
（细菌内同源重组AdEasy System）一、目的基因的克隆（以pshuttle-CMV质粒为例）步骤1、选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2、重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。3、重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4、用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。5、胶回收线性化质粒，以备共转化使用。二、共转化 1、大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 （1）从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
