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XL1-Blue 电击感受态细胞50ul*5

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  • 博湖
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  • 2025年07月08日
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    • 英文名

      XL1-Blue 电击感受态细胞

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海博湖

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      50ul*5

    XL1-Blue 电击感受态细胞50ul*5培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    产品名称:XL1-Blue 电击感受态细胞50ul*5
    规格:50ul*5
    分类:克隆感受态细胞
    保存条件(保质期):   -806个月)

    产品细节图片1
    XL1-Blue 电击感受态细胞50ul*5注意事项:
    1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
    2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
    3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
    4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
    5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
    6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
    7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
    力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
    8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
    CCL28 Protein Human 重组人 CCL28 蛋白 (His 标签)正十三烷基-beta-D-麦牙糖苷(>98%,BC)n-Tridecyl-b-D-maltopyranoside (e)质量规格:>98%,BC

    LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷细胞) 5×106cells/瓶×2 Cardioophin-1 / CTF1 人细胞裂解液 (阳性对照) 辛二酸(>98%,BR)Octanedioic acid质量规格:>98%,BR
    猪肾细胞;PK(15)橄榄油Olive oil质量规格:商品级
    TGFB1 Others Rat 大鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人细胞裂解液 (阳性对照) 邻甲氧基肉桂醛(>98%,BR)o-Methoxycinnamaldehyde质量规格:>98%BR
    神经小胶质细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)苔红素(合成)Orcein, synthetic质量规格:BS
    人星形胶质细胞氘代苯-D6(10g )Benzene-D6质量规格:D,99.5%

    人胚肺二倍体细胞;HL 人小肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL氘代苯-D6(10g )Benzene-D6质量规格:D,99.5%+0.03%TMS
    人类原巨核细胞型白血病细胞;UT-7氘代苯-D6(25g)Benzene-D6质量规格:D,99.5%
    LAG3 Others Rat 大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 人细胞裂解液 (阳性对照) 氘代苯-D6(50g)Benzene-D6质量规格:D,99.5%
    CM-R026大鼠骨髓基质细胞完全培养基100mL氘代苯-D6(100g )Benzene-D6质量规格:D,99.5%
    正十三烷基-beta-D-麦牙糖苷(>98%,BC)  n-Tridecyl-b-D-maltopyranoside (e)  质量规格:>98%,BC 小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP-L1 ELISA Kit

    辛二酸(>98%,BR)  Octanedioic acid  质量规格:>98%,BR 小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP-L2 ELISA Kit
    橄榄油  Olive oil  质量规格:商品级 小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP-L3 ELISA Kit
    邻甲氧基肉桂醛(>98%,BR)  o-Methoxycinnamaldehyde  质量规格:>98%BR 小鼠小核糖核蛋白多肽D1(SPD1)ELISA试剂盒 ,英文名: SPD1 ELISA Kit
    苔红素(合成)  Orcein, synthetic  质量规格:BS 小鼠心肌肌钙蛋白(cTn-)ELISA试剂盒 ,英文名: cTn- ELISA Kit
    邻香兰素(>98%,BR)  o-Vanillin  质量规格:>98%BR 小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
    (>98%,BR)  Oxalyldihydrazide  质量规格:>98%BR 小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-)ELISA检测试剂盒Mousecardiacoponin,cTn-ELISAKit 96T/48T
    恶唑(>96%BC)  Oxazole  质量规格:>96%BC 小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-)ELISA试剂盒 ,英文名: cTn- ELISA Kit
    乙酸钯  Palladium (II) acetate  质量规格:BC 小鼠心肌肌钙蛋白I(TNNI3)ELISA试剂盒 ,英文名: TNNI3 ELISA Kit
    氯化钯  Palladium (II) chloride  质量规格:BC 小鼠心肌肌钙蛋白T(TN2)ELISA试剂盒 ,英文名: TN2 ELISA Kit
    XL1-Blue 电击感受态细胞50ul*5小鼠腺苷酸环化酶10(ADCY10)ELISA试剂盒 ,英文名: ADCY10 ELISA Kit 正壬基-beta-D-麦牙糖苷(>98%,BC)  n-Nonyl-beta-D-maltopyranoside  质量规格:>98%,BC

    小鼠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒 ,英文名: PAPP-A ELISA Kit 正辛基-beta-D-麦牙糖苷(>98% (HPLC),BC)  n-Octyl-b-D-maltopyranoside  质量规格:>98% (HPLC),BC
    小鼠硝基酪酸()ELISA试剂盒 ,英文名:  ELISA Kit 壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC)  Nonyl β-D-glucopyranoside  质量规格:>98%,BC
    小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP-L1 ELISA Kit 正十三烷基-beta-D-麦牙糖苷(>98%,BC)  n-Tridecyl-b-D-maltopyranoside (e)  质量规格:>98%,BC
    小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP-L2 ELISA Kit 辛二酸(>98%,BR)  Octanedioic acid  质量规格:>98%,BR
    小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP-L3 ELISA Kit 橄榄油  Olive oil  质量规格:商品级
    小鼠小核糖核蛋白多肽D1(SPD1)ELISA试剂盒 ,英文名: SPD1 ELISA Kit 邻甲氧基肉桂醛(>98%,BR)  o-Methoxycinnamaldehyde  质量规格:>98%BR
    小鼠心肌肌钙蛋白(cTn-)ELISA试剂盒 ,英文名: cTn- ELISA Kit 苔红素(合成)  Orcein, synthetic  质量规格:BS
    小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 邻香兰素(>98%,BR)  o-Vanillin  质量规格:>98%BR
    小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-)ELISA检测试剂盒Mousecardiacoponin,cTn- 96T/48T (>98%,BR)  Oxalyldihydrazide  质量规格:>98%BR
    XL1-Blue 电击感受态细胞50ul*5操作说明:
    1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
    待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
    2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
    A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
    B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
    3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
    4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
    5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
    6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。

     

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