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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
S17-1 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*10
S17-1 感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:S17-1 感受态细胞100ul*10
规格:100ul*10
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
S17-1 感受态细胞100ul*10操作说明:
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
CX3CL1 Protein Canine 重组狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白乙基阿魏酸盐Ethyl Ferulate质量规格:美国进口
MFC(小鼠胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 C2 / Compleme Compone 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-羟基-4-甲氧基肉桂酸3-Hydroxy-4-methoxycinnamic Acid质量规格:美国进口
直结肠平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)吡嗪酰胺-d3Pyrazinamide-d3质量规格:美国进口
NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicasin / NCSTN 人细胞裂解液 (阳性对照) 地美环素Demeclocycline质量规格:美国进口
大鼠肠巨噬细胞完全培养基 100mL盐酸地美环素半水化合物Demeclocyclin hydrochloride hemihydrate质量规格:美国进口
人细胞;C-33A补骨脂宁;补骨脂异黄酮Corylin质量规格:HPLC≥98%,标准品
BTC Others Mouse 小鼠 BTC / Betacellulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 补骨脂素(标准品)Psoralen质量规格:HPLC≥98%,标准品
人急性T淋巴细胞性白血病细胞;I 2.1(CRL-2572)苍术素(标准品)Atractylodin质量规格:HPLC≥98%,标准品
18. 卵巢细胞系统草乌甲素(标准品)Bulleyaconitine A质量规格:HPLC≥98%,标准品
CM-R072大鼠肾管状上皮细胞完全培养基100mL草质素(标准品)Herbacetin质量规格:HPLC≥98%,标准品
胰岛素样生长因子I(57-70) Insulin-like Growth Factor I (57-70) 质量规格:>95%,BR 小鼠尾加压素2受体(S2R)ELISA试剂盒 ,英文名: S2R ELISA Kit
胰岛素样生长因子Ⅱ(69-84) Insulin-Like Growth Factor II(69-84) 质量规格:>95%,BR 小鼠味觉受体1型成员2(TAS1R2)ELISA试剂盒 ,英文名: TAS1R2 ELISA Kit
白介素-1β转化酶底物 Interleukin-1β Convertase Substrate 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA检测试剂盒MousePepsinELISAKit 96T/48T
下钙素 Katacalcin 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒 ,英文名: Pepsin ELISA Kit
肯普肽 Kemptide 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶(PG)ELISA试剂盒 ,英文名: PG ELISA Kit
运动升压素 Kinetensin 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶原A(PGA)ELISA试剂盒 ,英文名: PGA ELISA Kit
层粘连蛋白(925-933) Laminin (925-933) 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶原C(PGC)ELISA试剂盒 ,英文名: PGC ELISA Kit
层粘连蛋白(929-933) Laminin (929-933) 质量规格:>95%,BR 小鼠胃动素(MOT)ELISA试剂盒 ,英文名: MOT ELISA Kit
层粘连蛋白九肽,酰胺 Laminin Nonapeptide, Amide 质量规格:>95%,BR 小鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒 ,英文名: MTL ELISA Kit
白细胞焦激肽(4-8);Pheromonotropic五肽 Leucopyrokinin (4-8);Pheromonotropic Pentapeptide 质量规格:>95%,BR 小鼠胃泌素(GAS)ELISA试剂盒 ,英文名: GAS ELISA Kit
S17-1 感受态细胞100ul*10小鼠维生素E(VE)ELISA试剂盒 ,英文名: VE ELISA Kit 组胺素5 Histatin 5 质量规格:>95%,BR
小鼠维生素K1(VK1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 高钙血症恶性因子(1-34)酰胺,人 Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human 质量规格:>95%,BR
小鼠维生素K1(VK1)ELISA试剂盒 ,英文名: VK1 ELISA Kit 高钙血症恶性因子(1-34), 人 Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human 质量规格:>95%,BR
小鼠尾加压素2受体(S2R)ELISA试剂盒 ,英文名: S2R ELISA Kit 胰岛素样生长因子I(57-70) Insulin-like Growth Factor I (57-70) 质量规格:>95%,BR
小鼠味觉受体1型成员2(TAS1R2)ELISA试剂盒 ,英文名: TAS1R2 ELISA Kit 胰岛素样生长因子Ⅱ(69-84) Insulin-Like Growth Factor II(69-84) 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA检测试剂盒MousePepsin 96T/48T 白介素-1β转化酶底物 Interleukin-1β Convertase Substrate 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒 ,英文名: Pepsin ELISA Kit 下钙素 Katacalcin 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶(PG)ELISA试剂盒 ,英文名: PG ELISA Kit 肯普肽 Kemptide 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶原A(PGA)ELISA试剂盒 ,英文名: PGA ELISA Kit 运动升压素 Kinetensin 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶原C(PGC)ELISA试剂盒 ,英文名: PGC ELISA Kit 层粘连蛋白(925-933) Laminin (925-933) 质量规格:>95%,BR
S17-1 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:S17-1 感受态细胞100ul*10
规格:100ul*10
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
S17-1 感受态细胞100ul*10操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
CX3CL1 Protein Canine 重组狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白乙基阿魏酸盐Ethyl Ferulate质量规格:美国进口
MFC(小鼠胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 C2 / Compleme Compone 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-羟基-4-甲氧基肉桂酸3-Hydroxy-4-methoxycinnamic Acid质量规格:美国进口
直结肠平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)吡嗪酰胺-d3Pyrazinamide-d3质量规格:美国进口
NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicasin / NCSTN 人细胞裂解液 (阳性对照) 地美环素Demeclocycline质量规格:美国进口
大鼠肠巨噬细胞完全培养基 100mL盐酸地美环素半水化合物Demeclocyclin hydrochloride hemihydrate质量规格:美国进口
人细胞;C-33A补骨脂宁;补骨脂异黄酮Corylin质量规格:HPLC≥98%,标准品
BTC Others Mouse 小鼠 BTC / Betacellulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 补骨脂素(标准品)Psoralen质量规格:HPLC≥98%,标准品
人急性T淋巴细胞性白血病细胞;I 2.1(CRL-2572)苍术素(标准品)Atractylodin质量规格:HPLC≥98%,标准品
18. 卵巢细胞系统草乌甲素(标准品)Bulleyaconitine A质量规格:HPLC≥98%,标准品
CM-R072大鼠肾管状上皮细胞完全培养基100mL草质素(标准品)Herbacetin质量规格:HPLC≥98%,标准品
胰岛素样生长因子I(57-70) Insulin-like Growth Factor I (57-70) 质量规格:>95%,BR 小鼠尾加压素2受体(S2R)ELISA试剂盒 ,英文名: S2R ELISA Kit
胰岛素样生长因子Ⅱ(69-84) Insulin-Like Growth Factor II(69-84) 质量规格:>95%,BR 小鼠味觉受体1型成员2(TAS1R2)ELISA试剂盒 ,英文名: TAS1R2 ELISA Kit
白介素-1β转化酶底物 Interleukin-1β Convertase Substrate 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA检测试剂盒MousePepsinELISAKit 96T/48T
下钙素 Katacalcin 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒 ,英文名: Pepsin ELISA Kit
肯普肽 Kemptide 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶(PG)ELISA试剂盒 ,英文名: PG ELISA Kit
运动升压素 Kinetensin 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶原A(PGA)ELISA试剂盒 ,英文名: PGA ELISA Kit
层粘连蛋白(925-933) Laminin (925-933) 质量规格:>95%,BR 小鼠胃蛋白酶原C(PGC)ELISA试剂盒 ,英文名: PGC ELISA Kit
层粘连蛋白(929-933) Laminin (929-933) 质量规格:>95%,BR 小鼠胃动素(MOT)ELISA试剂盒 ,英文名: MOT ELISA Kit
层粘连蛋白九肽,酰胺 Laminin Nonapeptide, Amide 质量规格:>95%,BR 小鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒 ,英文名: MTL ELISA Kit
白细胞焦激肽(4-8);Pheromonotropic五肽 Leucopyrokinin (4-8);Pheromonotropic Pentapeptide 质量规格:>95%,BR 小鼠胃泌素(GAS)ELISA试剂盒 ,英文名: GAS ELISA Kit
S17-1 感受态细胞100ul*10小鼠维生素E(VE)ELISA试剂盒 ,英文名: VE ELISA Kit 组胺素5 Histatin 5 质量规格:>95%,BR
小鼠维生素K1(VK1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 高钙血症恶性因子(1-34)酰胺,人 Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human 质量规格:>95%,BR
小鼠维生素K1(VK1)ELISA试剂盒 ,英文名: VK1 ELISA Kit 高钙血症恶性因子(1-34), 人 Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human 质量规格:>95%,BR
小鼠尾加压素2受体(S2R)ELISA试剂盒 ,英文名: S2R ELISA Kit 胰岛素样生长因子I(57-70) Insulin-like Growth Factor I (57-70) 质量规格:>95%,BR
小鼠味觉受体1型成员2(TAS1R2)ELISA试剂盒 ,英文名: TAS1R2 ELISA Kit 胰岛素样生长因子Ⅱ(69-84) Insulin-Like Growth Factor II(69-84) 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA检测试剂盒MousePepsin 96T/48T 白介素-1β转化酶底物 Interleukin-1β Convertase Substrate 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA试剂盒 ,英文名: Pepsin ELISA Kit 下钙素 Katacalcin 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶(PG)ELISA试剂盒 ,英文名: PG ELISA Kit 肯普肽 Kemptide 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶原A(PGA)ELISA试剂盒 ,英文名: PGA ELISA Kit 运动升压素 Kinetensin 质量规格:>95%,BR
小鼠胃蛋白酶原C(PGC)ELISA试剂盒 ,英文名: PGC ELISA Kit 层粘连蛋白(925-933) Laminin (925-933) 质量规格:>95%,BR
S17-1 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
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