Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*10

产品名称：Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*10
规格：100ul*10
分类：表达感受态细胞
保存条件（保质期）：   -80℃（6个月）

Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*10注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3.  当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*10操作说明：
1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；   --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
人Butt淋巴瘤细胞;RAJI氧化铋Bismuth oxide 质量规格：AR,>99%
ICOS Others Human 人 ICOS / AILIM / CD278 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-氯-1,3-2-Chloro-1,3-propanediol质量规格：进口原装，98%
造骨细胞生长添加物ObGS富马酸比索洛尔Bisoprolol fumarate质量规格：>99%
TNFRSF13B Others Human 人 TNFRSF13B / TACI / CD267 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸溴己新Bromhexine HCl质量规格：度>99%
CP-88 草鱼胚胎细胞盐酸布比卡因Bupivacaine HCl质量规格：>95%,USP
HuH-6(人肝母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2苯氧乙酸(标准品)Phenoxyacetic acid质量规格：分析标准品
Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 内皮细胞生长培养基(即用型) 500ml菲(标准品)Phenanthrene质量规格：分析标准品,用于环境分析
人骨骼肌细胞裂解物HSkMCL芘(标准品)Pyrene质量规格：分析标准品
PRKCD Others Mouse 小鼠 PKC delta / PRKCD 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (-)-盐酸东莨菪碱(标准品)(−)-Scopolamine hydrochloride质量规格：分析标准品,99.0%
小鼠畸胎瘤细胞;P19十四烷(标准品)Tetradecane质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)
盐酸纳曲酮  Naltrexone hydrochloride  质量规格：>99%,BR 人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA检测试剂盒Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit 96T/48T
三苯胂氧化物  Triphenylarsine oxide  质量规格：BR 人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA检测试剂盒Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISAKit 96T/48T
5,7,4'-三羟基-8-甲基二氢黄酮(标准品)  5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人抗环胍氨酸肽抗体(CCP)ELISA检测试剂盒Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISAKit 96T/48T
芦荟苷B(标准品)  Aloin B  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人抗肌动蛋白抗体(AAA)ELISA检测试剂盒Humanai-Actinaibody,AAAELISAKit 96T/48T
牛蒡子苷元-4'-O-β-龙胆二糖苷(标准品)  Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA检测试剂盒HumanCollagenaoaibody,CLAELISAKit 96T/48T
罗汉松树脂酚-4'-O-β-龙胆二糖苷(标准品)  Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA检测试剂盒Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 96T/48T
石蕊  Litmus  质量规格：AR 人抗菌肽(Attacin)ELISA检测试剂盒HumanAttacinELISAKit 96T/48T
7-O-甲基芦荟新甙A(标准品)  7-O-Methylaloeresin A  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA检测试剂盒Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit 96T/48T
肉苁蓉苷A(标准品)  Cistanoside A  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA检测试剂盒HumanAi-Saccharomycescerevisiaeaibody,ASCAELISAKit 96T/48T
芦荟新甙D(标准品)  Aloeresin D  质量规格：HPLC≥98%,标准品 人抗鼠抗体(HAMA)ELISA检测试剂盒Humanaimousaibody,HAMAELISA 96T/48T
Rosetta 2(DE3) 感受态细胞100ul*10人抗促甲状腺素受体抗体(Ab)免疫试剂盒 human thyroid stimulating hormone receptor aidoby,Ab ELISA Kit 盐酸达泊西汀(右旋)  Dapoxetine hydrochloride  质量规格：>99%,右旋
人抗促卵泡素抗体(Ai FSH Ab)免疫试剂盒 Human Ai FSH Ab ELISA Kit 固黑K盐  Fast Black K Salt  质量规格：>80%,BR
人抗单核细胞抗体(AMA)免疫试剂盒 Human ai-Monocyte aibody,AMA ELISA Kit 氨基黑10B  Amido black 10B  质量规格：AR
人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA检测试剂盒Humanliverspecificlipoprotein,LSP 96T/48T 盐酸纳曲酮  Naltrexone hydrochloride  质量规格：>99%,BR
人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA检测试剂盒Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNP 96T/48T 三苯胂氧化物  Triphenylarsine oxide  质量规格：BR
人抗环胍氨酸肽抗体(CCP)ELISA检测试剂盒Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCP 96T/48T 5,7,4'-三羟基-8-甲基二氢黄酮(标准品)  5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone  质量规格：HPLC≥98%,标准品
人抗肌动蛋白抗体(AAA)ELISA检测试剂盒Humanai-Actinaibody,AAA 96T/48T 芦荟苷B(标准品)  Aloin B  质量规格：HPLC≥98%,标准品
人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA检测试剂盒HumanCollagenaoaibody,CLA 96T/48T 牛蒡子苷元-4'-O-β-龙胆二糖苷(标准品)  Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside  质量规格：HPLC≥98%,标准品
人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA检测试剂盒Humanai-filaggrinaibody,AFA 96T/48T 罗汉松树脂酚-4'-O-β-龙胆二糖苷(标准品)  Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside  质量规格：HPLC≥98%,标准品
人抗菌肽(Attacin)ELISA检测试剂盒HumanAttacin 96T/48T 石蕊  Litmus  质量规格：AR