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吉凯基因
基因研究中常需要通过上调靶基因的表达来观察表型变化。过表达(Over-Expression,OE)是上调基因表达最常用的方法,其基本原理是将目的基因的编码区(coding sequence,CDS)构建到质粒或病毒载体中,导入细胞内使基因的表达量增加。根据用途,载体主要分为克隆载体、原核表达载体、真核表达载体、慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、 逆转录病毒载体等。
过表达
过表达如何选择合适的载体呢?
首先我们需要考虑这几个方面:
1. 工具载体的表达时间与实验观察时间是否相符;
2. 工具载体可以容纳的片段大小与目的基因大小是否契合;
3. 工具载体对目的细胞、在体组织的转导是否足够高效。

其次,我们需要了解载体中的每一个元件代表什么。实际应用中,可根据实验目的来挑选合适的载体元件。下面是载体图谱上常见元件介绍:如启动子、荧光标签、抗性、多克隆酶切位点MCS等。

产品介绍
吉凯提供过表达质粒、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒AAV等产品。
载体选择
吉凯提供用于过表达编码基因和非编码基因的质粒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等多种载体。
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文献和实验引用文献
1. Identification of genomic alterations in oesophageal squamous cell cancer. 2014, Nature (IF= 41.577).
吉凯产品:过表达质粒。研究领域:食管鳞状细胞癌。中国医学科学院。
2. The Primate-Specific Gene TMEM14B Marks Outer Radial Glia Cells and Promotes Cortical Expansion and Folding. 2017, Cell stem cell (IF= 23.29).
吉凯产品:过表达质粒。研究领域:神经。中科院生物物理所。
3. The metabolic ER stress sensor IRE1α suppresses alternative activation of macrophages and impairs energy expenditure in obesity. 2017, NATURE IMMUNOLOGY (IF=21.506).
吉凯产品:过表达慢病毒。研究领域:能量代谢。中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所。
4. Cardiac Fibroblast-Specific Activating Transcription Factor 3 Protects Against Heart Failure by Suppressing MAP2K3-p38 Signaling. 2017, Circulation (IF= 18.881).
吉凯产品:过表达腺病毒。研究领域:心力衰竭。首都医科大学附属安贞医院。
5. Yes-Associated Protein Promotes Angiogenesis Via Signal Transducer and Activator of Transcription 3 in Endothelial Cells. 2018, Circulation research (IF= 15.211).
吉凯产品:过表达腺病毒。研究领域:血管生成。天津医科大学。
6. Transplanted Mesenchymal Stem Cells Reduce Autophagic Flux in Infarcted Hearts via the Exosomal Transfer of mir-125b. 2018, Circulation research (IF= 15.211).
吉凯产品:过表达腺病毒。研究领域:心肌梗死。浙江大学第二附属医院。
7. EphrinB2 Regulates Cardiac Fibrosis Through Modulating the Interaction of Stat3 and TGF-β/Smad3 Signaling. 2017, Circulation Research (IF=13.965).
吉凯产品:RNAi慢病毒和过表达慢病毒。研究领域:心脏纤维化。浙江大学医学院附属第二医院。
8. Aldehyde dehydrogenase-2 (ALDH2) opposes hepatocellular carcinoma progression by regulating AMP-activated protein kinase signaling in mice. 2017, Hepatology (IF=13.246).
吉凯产品:过表达慢病毒。研究领域:肝癌。第二军医大学。
9. Deficiency of tumor suppressor NDRG2 leads to attention deficit and hyperactive behavior. 2017, The Journal of Clinical Investigation (IF=13.251).
吉凯产品:过表达腺病毒。研究领域:多动症。空军军医大学(第四军医大学)附属西京医院。
10. Gephyrin Palmitoylation in Basolateral Amygdala Mediates the Anxiolytic Action of Benzodiazepine. Biological Psychiatry (IF= 11.982).
吉凯产品:过表达AAV。研究领域:焦虑症。华中科技大学同济医学院。
11. Gene deficiency and pharmacological inhibition of caspase-1 confers resilience to chronic social defeat stress via regulating the stability of surface AMPARs. Molecular Psychiatry (IF= 11.64).
吉凯产品:过表达AAV。血清型:AAV1。研究领域:抑郁症。华中科技大学同济医学院。
12. Long non-coding RNA H19 contributes to apoptosis of hippocampal neurons by inhibiting let-7b in a rat model of temporal lobe epilepsy. Cell Death and Disease (IF=5.638).
吉凯产品:干扰和过表达AAV。血清型:AAV9。研究领域:颞叶癫痫。首都医科大学。
在动物实验中,我们经常会通过过表达/敲低某个基因,观察对模型的影响来研究该基因的功能。病毒载体作为高效、安全的基因递送载体,在动物体内基因表达调控研究中得到广泛应用。 组织特异性启动子又称为器官特异性启动子,在这类启动子的作用下,基因的表达往往只限于某些特定的组织或器官,同时表现出发育调节等特性,从而克服了组成型启动子启动的外源基因在受体植物中非特异、持续、高效表达所造成的浪费,增加转基因的效果,因此人们对特异性启动子的研究和应用中备受青睐。 慢病毒(LV)、腺病毒(AD)、腺相关病毒(AAV
腺相关病毒(AAV)作为一种安全、持久、高效、高特异性的基因操作工具,在生物学特别是神经生物学领域中被广泛使用。许多新手对于 AAV 的使用往往是知其然而不知其所以然。这篇短文将以图文结合的形式争取让大家在最短的时间内全面了解这种病毒工具。 什么是 AAV? 野生型 AAV 是一种复制缺陷型微小病毒,需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。而我们做实验用的是不需要辅助病毒的重组 AAV 病毒(rAAV)。将目的基因的 CDS 区序列或者 RNAi 干扰序列插入 rAAV 表达质粒中,包装病毒
1、研究中该如何选择 AAV 血清型和剂量? 您可以在我们的血清型选择指南中找到所有血清型和组织趋向性的介绍。 2、重组 AAV 是复制缺陷的吗? 对于野生型 AAV,如果没有辅助病毒(如腺病毒)的存在,其复制效率极低。对于现在生产的重组 AAV,复制和衣壳基因是在 Rep/Cap 质粒中提供的。只有 AAV 基因组的两个 ITR(倒置末端重复序列)被保留并包装成病毒颗粒,而所需的腺病毒基因要么是由腺病毒提供的,要么是由另一个质粒提供的。理论上,重组 AAV 是不可能复制的。 3、AAV
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