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免疫共沉淀检测服务
实验原理:
基本原理是在细胞裂解液中加入抗原特异的抗体进行孵育,若裂解中有和抗原互作的蛋白,则会形成“抗体-抗原-抗原互作蛋白”的免疫复合物,该免疫复合物经纯化、洗脱、收集,即可用于SDS-PAGE,western blot及质谱分析,进而鉴定出与抗原有互作的蛋白质。
客户提供:
1、组织、细胞、蛋白质溶液等样品、用于免疫共沉淀的一抗及目的蛋白的相关信息;
2、如需构建基因的过表达载体,则还需提供过表达载体及其相关信息,没有载体的我司可以构建载体;
3、其他与免疫共沉淀相关信息。
结果交付:
1、免疫共沉淀电子图片及分析结果;
2、相互作用蛋白鉴定结果;
3、完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。
基本原理是在细胞裂解液中加入抗原特异的抗体进行孵育,若裂解中有和抗原互作的蛋白,则会形成“抗体-抗原-抗原互作蛋白”的免疫复合物,该免疫复合物经纯化、洗脱、收集,即可用于SDS-PAGE,western blot及质谱分析,进而鉴定出与抗原有互作的蛋白质。
客户提供:
1、组织、细胞、蛋白质溶液等样品、用于免疫共沉淀的一抗及目的蛋白的相关信息;
2、如需构建基因的过表达载体,则还需提供过表达载体及其相关信息,没有载体的我司可以构建载体;
3、其他与免疫共沉淀相关信息。
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1、免疫共沉淀电子图片及分析结果;
2、相互作用蛋白鉴定结果;
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文献和实验相关实验
原理 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是利用抗原和抗体的特异性结合以及 Protein A 或 G 特异性地结合到抗体的Fc 片段的现象探测两个蛋白分子间是否存在相互作用的一种方法。在细胞裂解液中加入针对蛋白M的抗体,孵育后再加入Protein A 或 G 预处理的 Sepharose 珠,若细胞中有与蛋白M结合的蛋白 N,就可以形成这样一种复合物:“蛋白 N-蛋白M—抗蛋白 M 抗体—Protein A 或 G—Sepharose 珠”,经 SDS
您对蛋白-蛋白互作检测的金标准——免疫共沉淀了解多少?Dr. 赛带您从原理出发揭开免疫共沉淀实验的神秘面纱,手把手教您设置对照,选择固相介质,逐一了解影响免疫共沉淀实验的关键因素。
mijiagaga 有郁闷问题想请教各位大侠: 我做免疫共沉淀,从细胞中提取内源性表达的蛋白,按照常规方法做,可是最后银染总是没有条带? 多谢多谢! woxingwosu 有几个问题需要确认一下: 1. 你做免疫共沉淀(IP)的抗体是否可以用。WEstern能识别的抗体不一定能用在IP。 2. 内源性蛋白的表达量。需要先确认一下这个蛋白的表达量,如果这个蛋白本来表达量就很低
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