- 询价
- 免疫荧光
- 全国
- 2026年01月13日
企业认证
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
武汉恒意赛生物科技有限公司
- 服务名称：
免疫荧光
免疫荧光实验步骤
1. 石蜡切片置于65℃烘箱中烘片2h，脱蜡至水，用PBS洗三次，每次5 min。
2. 切片置于EDTA缓冲液中微波修复，中火至沸后断电，间隔10min低火至沸。
3. 自然冷却后PBS洗3次，每次5 min。
4. 切片置于3%过氧化氢溶液中，室温下避光孵育10 min。
5. PBS洗3次，每次5 min，甩干后5% BSA封闭20 min。
6. 去除BSA液，每张切片加入约50μl稀释的一抗（见附录1）覆盖组织，4℃过夜。
7. PBS洗3次，每次5 min。
8. 去除PBS液，每张切片加50μl-100μl相应种属的二抗（见附录2），37℃孵育50min。
9. PBS洗3次，每次5min。
10.去除PBS液，每张切片加50-100μlDAPI染液，室温避光孵育5min。
11.染色后将切片放入PBS中洗3次，每次5min。
滴加适量的抗荧光淬灭剂于组织上，盖玻片封片，荧光显微镜下观察。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验固定和透化 在培养板中将已爬好细胞的盖玻片用 1 × PBS 浸洗 3 次，每次 3 min。 用 4% 的多聚甲醛固定爬片 15 min，1 × PBS 浸洗玻片 3次，每次 3 min。 0.5%Triton X-100(1× PBS 配制 )室温通透细胞 15 min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）, 1 × PBS 浸洗玻片 3 次，每次 3 min。 封闭 吸水纸吸干 1 ×PBS，在玻片上滴加 5% 的正常血清（与二抗种属来源一致或相似），室温封闭 1 h
实验流程：多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上，随后即可衔接下一轮单标染色，直至全部标记完成，即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合：1）新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2）梯度乙醇浸片，100% 5min；95% 5min；70% 2min。3）灭菌水洗片1min，重复3次。4）10%中性福尔马林浸片10min，灭菌水洗片1min，重复3次。2.微波修复：1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中，用抗原
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
