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武汉恒意赛生物科技有限公司
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冰冻切片
冰冻切片实验步骤
1、取材:将动物处死后,低温环境下取出新鲜组织放入-80℃冰箱冷冻备用。
2、包埋:将冷冻的组织根据需要切成小块放于冰托上,用OTC包埋剂将组织完全覆盖,放入冰冻切片内冷冻。
3、切片:将冷冻好的组织以及冰托固定在冰冻切片机上,按照需求调整好厚度进行切片,一般切4-8μm。
4、固定:将切好的组织片用载玻片贴起,放入甲醛固定中固定30s-1min。固定后冷冻起备用。
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文献和实验冰冻切片免疫组织化学染色 1.新鲜组织或在-80℃保存的组织用恒冷箱冰冻切片机切片,厚度为10~40gm; 2.将切片裱于载玻片上,立即用电吹风吹干或室温放置30分钟,如不能及时染色,密封后一20℃保存; 3.染色前组织切片用冷丙酮4℃固定10―20分钟,PBS洗2次,每次5分钟; 4。必要时应用0.1%枸橼酸钠与0.1%Triton X―100的混合液将细胞膜打孔。 其余步骤同石蜡切片。SABC法染色,DAB显色大鼠小肠腺细胞核呈棕色为BrdU免疫
上一期,我们为大家介绍了—Visium 空间基因表达解决方案-样本冰冻包埋指南,本期我们将为大家介绍冰冻切片制备指南!满满的干货,记得收藏哦! 首先,为大家推荐一款用于Visium空间基因表达解决方案的冰冻切片机——Leica CM1950! 其电动切片、步进马达确保冷冻切片的厚度、质量及切片间一致性;精细的定位控制可以满足对细微组织的精密切割;强大的制冷系统为切片温度提供了有力保障! 在基于配备了CM1950冰冻切片机的条件下,在切片之前,我们需要考虑的主要问题有以下三个: 1,冰冻切片
一、组织和细胞标本类型:(一) 组织标本类:1、 石蜡切片:组织形态保存好2、 冰冻切片:抗原性保存好(二)细胞标本类:1、组织印片 2、细胞培养片(细胞爬片) 3、细胞涂片二、组织取材1、脑组织和神经组织应采用灌注固定后,再进行后固定。2、组织取材注意事项:(1)标本新鲜:组织要求离体后30min~2h内浸入固定液,尤其是开展分子生物学工作。动物组织取材要求心脏还在跳动时取材。(2)注意防止人为因素的影响 刀和剪要快,避免挤压。(3)组织块的大小 厚为0.1~0.3cm,大小可根据需要而定
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