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- 2026年01月13日
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Label Free实验
服务介绍
非标(Label-free)蛋白质组定量技术是一种不依赖于同位素标记的新型蛋白质定量技术，该技术通过液质联用质谱仪对蛋白质酶解肽段进行分析，无需昂贵的稳定同位素标签做内部标准，只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据，比较不同样本中相应肽段的信号强度，就能对相应的蛋白质进行相对定量。
技术优势
1. 不需要昂贵的同位素标记，实验费用底的差异蛋白表达分析技术；
2. 对样本的操作最少，从而使其最接近原始状态。
客户提供
1. 蛋白质提取物（浓度 >1μg/μl，蛋白质总量 >200μg）；
2. 细胞样品（细胞量>107）；
3. 组织样品（动物、微生物组织湿重>10mg；植物鲜嫩组织>100mg）；
4. 体液样品（血液体积>500μl）。
最后交付
完整的实验报告包括试剂耗材，厂家货号，实验步骤，实验结果及分析等。
参考文献
1. Vanderschuren H, Nyaboga E, et al. Large-Scale Proteomics of the Cassava Storage Root and Identification of a Target Gene to Reduce Postharvest Deterioration. Plant Cell. 2014.
2. Cholewa BD, Pellitteri-Hahn MC, et al. Large-Scale Label-Free Comparative Proteomics Analysis of Polo-Like Kinase 1 Inhibition via the Small-Molecule Inhibitor BI 6727 (Volasertib) in BRAFV600E Mutant Melanoma Cells. J Proteome Res. 2014 Jun 9.
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文献和实验本节课程介绍了label-free定量蛋白质组学技术的原理及应用。主要包括：（1）以MS数据为例，系统介绍label-free技术进行蛋白质定量的技术流程和原理。（2）介绍免费的label-free分析套件—Maxquant和Perseus。（3）以免疫沉淀（IP）数据为例，展示label-free进行蛋白质互作定量的应用。（4）以数据为例，展示label-free在外泌体蛋白定量分析中的应用。
Label-Free Proteomics of Serum
In this chapter we describe a method to analyze human serum with the goal of discovering disease-related changes in the serum proteome. The methodology is based on the removal of the six most abundant serum proteins by immunoaffinity
行串联质谱分析，可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。 iTRAQ技术特点： 不同样本标记之后混样，统一处理上机，减少了分别上机造成的实验误差，并利用同位素标签的丰度来检测，定量更准确，重复性更好； 由于需要标记试剂标记，因此成本相对较高； 通量高，在一次实验中最多可同时比较8个样品； 利用基于同一个参考样品的办法，可以进行多于8个样品的定量比较； iTRAQ的覆盖度高、灵敏度高。 Label-Free定量蛋白质组学分析 Label-Free定量，即非标记的定量
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