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- qRT-PCR技术已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法，能够专一、灵敏、快速、高重复的精确定量起始模板的浓度，可用于miRNA、mRNA、lncRNA及DNA等分子定量检测。
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- 2026年01月12日
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qRT-PCR
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广州伯信生物科技有限公司
qRT-PCR技术已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法，能够专一、灵敏、快速、高重复的精确定量起始模板的浓度，可用于miRNA、mRNA、lncRNA及DNA等分子定量检测。miRNA是一类由大约22个核苷酸组成的单链非编码小分子RNA，参与多个生理活动过程的调控。但由于长度太短，一般难以检测。伯信生物通过SYBR green法或者Taqman法对通过特异性引物可检测微量样品的miRNA的表达水平。
客户提供
① 物种信息；
② 组织（大于100mg）、细胞（大于106）、血清或总RNA（大于 0.5ug/样品）；
③ miRNA名称及 ID；
伯信提供
① qRT-PCR的原始数据；
② 实验报告（实验仪器、试剂、方法、结果、结论）。
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文献和实验性，因为他们只是反应rRNA的量来间接测定mRNA的完整性。这里推荐一种方法：采用GAPDH的3’：5’分析法。我们使用oligo dT进行逆转录，然后对逆转录的cDNA用multiplex荧光定量评价。设计三个taqman探针来定量三种相同大小的扩增产物。探针设计的位点分别位于3’;5’以及中部。扩增产物的之间的比值反应RNA的完整性。如果3’;5’的比值在1,反应较高度完整性，如果高于5说明降解。QRT-PCR 抑制物的组成QRT-PCR抑制物严重减少了PCR的灵敏度以及热动力学反应,高度的抑制还导致假阴
【求助】miRNA mimic qRT-PCR检测可以提高多少倍？
nvonne 我购买的miRNA mimic 带FAM标记，本打算用流式检测转染效率，但发现荧光信号很弱，转染后采用定量PCR检测miRNA的表达变化，相对定量分析，发现mimic组比NC阴性对照组的miRNA表达量提高了100多倍，这虽然表明转染mimic成功，但总感觉这么高的变化有点太离谱了是不是？也没查到相关文献，谁能给我一些参考？非常感谢 zhujoker 顺转就是这么高，我的也是这样，有的能够上调1000倍
Comparison of normalisation methods There is an ongoing debate what is the best way to normalise qPCR data. Reference genes are the most common method, although single unverified reference genes invalidate the qPCR data generated. Total RNA
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