【求助】miRNA mimic qRT-PCR检测可以提高多少倍？
丁香园论坛
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我购买的miRNA mimic 带FAM标记，本打算用流式检测转染效率，但发现荧光信号很弱，转染后采用定量PCR检测miRNA的表达变化，相对定量分析，发现mimic组比NC阴性对照组的miRNA表达量提高了100多倍，这虽然表明转染mimic成功，但总感觉这么高的变化有点太离谱了是不是？也没查到相关文献，谁能给我一些参考？非常感谢
顺转就是这么高，我的也是这样，有的能够上调1000倍
非常感谢zhujoker版主的答复！
zhujoker wrote:
顺转就是这么高，我的也是这样，有的能够上调1000倍
转染量降一降是否可以呢！？
要看miRNA自身的表达量
如果细胞中该miRNA是低表达的，则加入miRNA mimics可以发现成百上千倍的提高；
如果是高表达的，这种提高就明显低很多，甚至变化不大。
如果细胞中该miRNA是低表达的，则加入miRNA mimics可以发现成百上千倍的提高；
如果是高表达的，这种提高就明显低很多，甚至变化不大。
请问楼主用的哪个公司的mimics，我最近也要做这个。
非常感谢。
非常感谢。
锐博生物的miRNA mimics
请问楼主100倍是怎么算出来的？做PCR用转染阳性的Ct值与转染阴性的Ct值比吗？还是要求△△ct？？？求解。。。
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