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- 百奥莱博
- BTN130564-EKC
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
117
- 英文名：
E.coli Tuner(DE)plysS Rosetta Competent Cell
- 保质期：
6个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
- 规格：
0.1mL*10
特别提示：包括大肠杆菌Tuner(DE)plysS感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：大肠杆菌Tuner(DE)plysS感受态细胞
英文名称：E.coli Tuner(DE)plysS Rosetta Competent Cell
产品货号：BTN130564
产品规格：0.1mL*10
Tuner(DE3)plysS是的Tuner(DE3)衍生菌株，为高度严紧表达宿主菌，用于毒性蛋白表达，lac 透性酶突变，可以精细控制表达水平。抗性为氯霉素(34μg/ml)。
基因型：F–ompT hsdSB(rB– mB–)gal dcm lacY1(DE3)plysS(CmR)
储存条件：干冰运输，-80℃保存，有效期6个月。
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文献和实验实验目的1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。实验原理转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。转化中的受体细胞： 转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株，常用 RM 符号表示。转化方法：电击
4．操作步骤 1）大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落，接种于3～5ml LB液体培养中，37℃振荡培养12h左右，直至对数生长期。将该菌悬液以1:100～1:50转接于100ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20～30min测一次OD600nm，至OD600nm≤0.5时停止培养；(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中，在冰上冷却20-30min，于4℃，4000r／
酶和甲基化酶的突变体（Rˉ，Mˉ），它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法（如电击法，CaCl2，RbCl（KCl）等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞（Compenent cells）。进入受体细胞的DNA分子通过复制，表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养，即可筛选出转化子（Transformant，即带有异源DNA分子的受体细胞）。目前常用的感受态细胞
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