北京大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIP

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞品牌，产品信息：

类别：克隆与表达

英文名：E.coli BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL Chemical Competent Cell

产品名	产品编号	包装规格
大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞	BTN140378	10*100μl

编号：BTN140378

规格：10*100μl

品牌：百奥莱博

产地：国产|进口

本产品来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解，补充大肠杆菌缺乏的4 种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA)对应的tRNA(argU、ileY、proL、leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，*霉素，链霉素，壮观霉素抗性。本产品由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。

菌株基因型为：F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。

 

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

 

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

 

使用方法：

1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。

以下实验以100μl感受态细胞为例。

2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。

3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。

4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。

5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

 

注意事项：

1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。

2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

4. 诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。

5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

北京大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞品牌专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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编号	类别	名称
BTN60802A	DNA纯化	柱式细菌DNA提取试剂盒
BTN120512	克隆与表达	即用型蓝白T载体B型(T7-T3，有MCS)
BTN120705	蛋白质研究	L-谷胱甘肽(还原型)
BTN131103	蛋白质研究	生物素化山羊抗亲和素
BTN130661	蛋白质研究	RecA蛋白
BTN140389	克隆与表达	酿酒酵母Y187感受态细胞
BTN131022	蛋白质研究	AP标记的链霉亲和素
BTN90317	核酸电泳和回收	一站式DNA尿素-PAGE电泳套装
BTN70401	RNA纯化	软骨RNA提取试剂盒
BTN70503Z	核酸电泳和回收	DNA marker(300-10000bp)
BTN140385	克隆与表达	农杆菌LBA4404化学感受态细胞
BTN60906	核酸扩增(PCR)	cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒)
BTN70104	探针标记及检测	核酸印迹膜染液
BTN100937	工具酶	phi29 DNA聚合酶
BTN140387	克隆与表达	酿酒酵母EGY48化学感受态细胞
BTN131029	工具酶	胰蛋白酶(质谱级)
BTN130931	DNA纯化	Southern级血液DNA提取试剂盒
BTN100912B	蛋白质研究	长效期SDS-PAGE电泳液(2-30 KD)(干粉)
BTN60602	DNA纯化	柱式植物DNA提取试剂盒
BTN3120	核酸电泳和回收	微量RNA助沉剂
BTN131283	其他细胞生物学试剂	多聚甲醛-*氧化*固定液
BTN91106	核酸扩增(PCR)	T7体外转录试剂盒
BTN100915	蛋白质研究	SDS-PAGE预制胶
BTN81102	RNA纯化	石蜡包埋组织RNA提取试剂盒
BTN120408	工具酶	绿豆核酸酶

 

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