腺病毒载体构建及病毒包装技术服务

研究哺乳动物细胞中高效瞬时过表达目的基因，腺病毒系统是具备实现这样目的可靠平台。当研究的靶细胞用常规的脂质体转染无法达到预期的效果，不能满足后续实验要求是，腺病毒将会成为研究实验的首选。病毒可以侵染如原代或非分裂细胞，利用病毒递送外源基因至靶细胞内是非常有效的选择。我们通常采用293腺病毒包装细胞系进行包装。该细胞内含有腺病毒包装所必需的E1基因序列，是专为生产腺病毒和进行滴度测定而建立的），用于高滴度的复制缺陷型（E1和E3缺失）腺病毒的生产，可以不断扩增，能够满足有后续动物实验注射用病毒量。

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【特 点】

♦ 技术平台：腺病毒表达系统。

♦ 腺病毒载体感染宿主的范围比较广，几乎可以感染所有类型的细胞制备容易，操作简单。

♦ 病毒滴度高，产生病毒经过浓缩后可以达到10¹² PFU/mL，能有效的进行增殖，并适合进行高通量应用。

♦ 为提供克隆空间，缺失了E1和E3早期区，生物安全性高，不整合到染色体中，无插入致突变性。

【服务流程】

1. 腺病毒表达载体构建（过表达、shRNA i），消化纯化后质粒。

2. 腺病毒的制备，表达载体脂质体转染到293A包装细胞。然后收获细胞获取病毒粗提液。

3. 病毒粗提液感染293A细胞，以扩增病毒，检测病毒滴度。

4. 用病毒上感染靶细胞。

5. 收集细胞做相关WB检测。

【客户提供】

♦ 含有目标基因的质粒（提供测序结果）或所要表达的目的基因的名称，由我们从J基因库调取。

♦ 病毒滴度及总量，是否需要对病毒纯化（费用另计）。

♦ 检测用外源目的基因相应的抗

【我们提供】

♦ 重组后的携带目的基因的腺病毒载体质粒及菌液，病毒滴度结果、完整实验报告。

♦ 腺病毒储存液1ml ,规格： 1X10^11 PFU/ML 及阴性对照。

【质量保证】

♦ 至少1ml 活性滴度为1X 10^10-11 PFU/ml的病毒原液.