慢病毒载体具有宿主范围广，免疫原性低，基因容量大，可以长期表达等特点。能够有效地感染培养的肿瘤细胞、肝细胞、心肌细胞、神经元、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞。

慢病毒的感染具有整合特性，能够将外源基因有效地整合到宿主染色体上，达到持久性表达，因而可构建稳转细胞株，用于基因的细胞功能研究。使用慢病毒载体改造T细胞可用于CAR-T细胞治疗，CRISPR/Cas9文库构建使用的也是慢病毒载体。

1.2 慢病毒载体优势

1）表达时间长：慢病毒可将外源基因整合到宿主细胞基因组上，实现基因长时间稳定的表达，不随细胞分裂传代而丢失，细胞实验必选，常用于构建稳转株。

2）安全性高：未发现致病性，慢病毒载体改造T细胞用于CAR-T细胞治疗。

3）免疫原性低：直接注射活体组织不易造成免疫反应，适用于动物实验。

1.3 常规应用

体外感染细胞

慢病毒载体能够有效地感染培养的肿瘤细胞、肝细胞、心肌细胞、神经元、内皮细胞、干细胞等多种类型原代细胞和大部分细胞系。

慢病毒的感染具有整合特性，能够将外源基因有效地整合到宿主染色体上，因而可以达到持久性表达，从而构建稳转细胞株，用于基因的细胞功能研究。

慢病毒体外感染细胞的效果图

慢病毒与腺病毒、腺相关病毒、逆转录病毒载体相比，具有宿主范围广，免疫原性低，基因容量大，可以长期表达等特点。慢病毒包装主要用于难转染细胞的感染，稳转株的制备，神经系统的定位注射实验。难转染的细胞主要包括干细胞、免疫细胞（如DC细胞）、肿瘤细胞等，此外，慢病毒还可以感染仓鼠胚胎制备转基因动物。 

慢病毒感染细胞时，由于细胞的来源、代数和细胞状态等因素的影响，MOI值在不同实验室也略有差异，下面我们提供公司部分细胞的慢病毒MOI感染参数，供实验参考（以下数据是细胞感染效率在80%细胞状态良好的情况下获得的）：

1.4 案例介绍（和元客户文章）

1.4.1 慢病毒在肿瘤研究中的应用

常通过构建稳转株，体外进行细胞功能学实验，进一步构建肿瘤模型，验证基因功能。
【1】Nature Communications. (IF=12.353). Shi Y,et.al. (2017). Tumour-associated macrophages secrete pleiotrophin to promote PTPRZ1 signalling in glioblastoma stem cells for tumour growth.[慢病毒, 胶质细胞瘤]
慢病毒干扰： Lenti-shNT/shPTN/shPTPRZ1

【2】Hepatology. (IF=14.079). Ma JZ,et.al. (2016). METTL14 suppresses the metastatic potential of HCC by modulating m6 A-dependent primary miRNA processing. [慢病毒, 肝癌]
慢病毒过表达/干扰：pLV-CMV-PGK-EGFP-T2A-puro/ pLV-U6-shRNA-CMV-EGFP-T2A-puro

1.4.2 慢病毒在神经系统的应用（在体注射）

1．Nature Neuroscience. (IF=19.912). Ding XL,et.al. (2017). Activity-induced histone modifications govern Neurexin-1 mRNA splicing and memory preservation. [慢病毒, 学习与记忆]

病毒类型：慢病毒
载体名称：LV-Suv39h1-RNAi（不确定详细的）
注射部位：海马DG区
病毒注射量：2 μL，9.98 × 10⁸ TU/mL
检测时间：2周

2．Nature Communications. (IF=12.353). Yao XH,et.al. (2016). Electrical coupling regulates layer 1 interneuron microcircuit formation in the neocortex. [慢病毒, 神经环路]

病毒类型：慢病毒
载体名称：LV- CX36-shRNA-EGFP（不确定详细的）
注射部位：P1小鼠新皮层L1
病毒注射量：1μL
检测时间：2周

3．Molecular Psychiatry. (IF=11.64). Guo DJ,et.al. (2019). Autism-like social deficit generated by Dock4 deficiency is rescued by restoration of Rac1 activity and NMDA receptor function. [慢病毒, 自闭症]

病毒类型：慢病毒
载体名称：Lenti-CMV-EGFP-P2A-3FLAG-Rac1
注射部位：小鼠海马CA1区
病毒注射量：1μL
检测时间：4周

1.5 慢病毒延伸服务

和元上海慢病毒的生产和质控采取了国际学术界公认的标准流程，采用三质粒或四质粒系统在293T细胞中进行包装。所获得的病毒颗粒经过超速离心纯化，并通过qPCR对病毒基因拷贝进行滴定。一般情况下我们的慢病毒的滴度在108~109TU/ml，完全可以满足各类实验的使用要求。

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