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- NobleRyder
- P0825
- 北京
- 2025年12月16日
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99
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12个月
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北京诺博莱德科技有限公司
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已收到实际货物为准
| SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×) |
SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液即SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的5 倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
NobleRyder SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)常用于SDS-PAGE 蛋白样品的上样，含少量DTT，但不含有毒物质β-巯基乙醇。
产品组成：
| 编号 名称 |
P0825 | P0825 | P0825 | Storage |
| SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×) | 1ml | 5×1ml | 10ml | -20℃ |
| 使用说明书 | 1份 | |||
1、 在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE 蛋白加样缓冲液(5×)。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
2、 取适量的蛋白样品和SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)按4:1 混合，充分混匀。
3、 100℃或沸水浴加热5～10min，以充分变性蛋白。
4、 冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
5、 通常电泳至蓝色染料到达PAGE 胶的底部附近即可停止。
注意事项：
- SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)中含少量DTT，有轻微刺激性气味。
- SDS-PAGE Sample Loading Buffer(5×)必须完全溶解后再使用。
SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×) 有效期：12个月有效。亦可4℃短期保存。
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文献和实验的用量每次为0.5-1毫升。洗涤时离心条件和吸除上清的要求同上面的步骤C3。 5）.完成最后一次洗涤后，去除上清，加入20-40微升1XSDS-PAGE电泳上样缓冲液Vortex重悬沉淀，瞬时高速离心把样品离心至管底。 6）.100℃或沸水浴处理3-5分钟，取部分或全部样品可测定浓度或者用于SDS-PAGE电泳，暂时不用的样品可以-20℃保存。Western blot检测实验试剂：Phosphotyrosine抗体( Millipore, #05-321, 1:500)；Goat Anti
蛋白质经SDS-PAGE后，胶片浸入转印缓冲液，蛋白质可被转印到硝化纤维纸（nitrocellulose） 上，先经尿素洗去SDS,并使蛋白质回复原态抗原性，可使用抗体进行免疫染色 （Towbin et al, 1979）。仪器用具：电泳转印槽 （Hoefer Transphor TE 52）：转印槽 （可容纳4 个转印三明治）转印三明治 （转印夹、方形海绵垫2 片）转印纸：早期使用硝化纤维纸，现在多用尼龙材质者Immobilon P （Millipore IPUH 000 10, 0.45
ul，再加50ul 2×上样缓冲液，煮10min，取20ul上样，就可以了。 7、检测蛋白诱导： 从培养的不同时期各取出1ml，12000g×1min离心。将沉淀重悬于100ul 1×SDS上样缓冲液（50mM Tris-Cl（pH6.8），100mM DTT，2％SDS，0.1％溴酚蓝，10％甘油）中，100℃加热3min，然后12000g×1min离心。上样15ul，6％SDS-PAGE电泳。 《分子克隆》P826 8、5-10秒离心，弃除上清，用50ul蒸馏水重悬沉淀。加入
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