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3年
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pENTR223-EGFlAM(BC063822.1)
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100
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上海柯雷生物
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20ul
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文献和实验图位克隆(Ｍａｐ-ｂａｓｅｄｃｌｏｎｉｎｇ)又称定位克隆(ｐｏｓｉｔｉｏｎａｌｃｌｏｎｉｎｇ),1986年首先由剑桥大学的Ａｌａｎｃｏｕｌｓｏｎ提出,用该方法分离基因是根据目的基因在染色体上的位置进行的,无需预先知道基因的ＤＮＡ顺序,也无需预先知道其表达产物的有关信息,但应有以下两方面的基本情况:一是有一个根据目的基因的有无建立起来的遗传分离群体,如Ｆ、ＤＨ、ＢＣ、ＲＩ等。二是开展以下几项工作:1)首先找到与目标基因紧密连锁的分子标记;2)用遗传作图和物理作图将目标基因定位在染色
我们实验室在半年时间里构建过500多个腺病毒载体，积累了很丰富的亚克隆构建的经验，愿意与大家分享，我想分以下几个专题进行讲解， 一、大批量构建亚克隆载体的一些经验 二、腺病毒载体系统的选择 三、实验中的一些小技巧 一、大批量构建亚克隆载体的一些经验 1）善于利用 生物 信息学和计算机程序。 A：批量下载基因序列
我的题目是鸡Mx基因的克隆，我的策略是先根据该基因家族(dynamin family)的氨基酸保守区设计简并引物克隆出该基因cDNA的部分片段，然后根据该片段序列设计基因特异性引物，利用RACE技术得到cDNA的3‘和5’末端，然后根据末端序列设计引物扩增出该基因全长cDNA. 我用简并引物从鸡cDNA中扩增出一个片段，约250bp, 测序后拿来BLAST时却发现，与之同源性最高的并不是其它的Mx基因，而是人的某一个基因，比对的结果中与该序列同源性较高的有人及鼠Mx基因，但是同源性并不
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